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蛋白质功能研究方案

问:5种蛋白质研究方法都是什么?
  1. 答:本文概括了研究蛋白质的五种方法的原理闷租盯及优缺点。1.荧光共振能量转移;2.蛋白质双杂交技术;3.噬菌体展示技术;4.蛋白蚂和型启质的亲和色谱;5.亲和印迹。
    ……
    详细资料请参考:on
问:蛋白质相互作用如何研究?要研究一种蛋白的功能要从何开始?如何进行研究?
  1. 答:确证蛋白质蛋白质相互作用可以用酵母双杂交系统(Yeast two-Hybrid System),荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer)等;
    研究与特定蛋白相互作用的有噬菌体展示(Phage Display),免疫共沉淀(co- Immuno precipitation),蛋白质芯片等;
    研究蛋轮斗颤白质互作动力学的有等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance)等;
    研究蛋白质互作的结构则销逗需要X射线,NMR等。
    研究未知蛋白的功能可以用基因敲除或RNA干扰等使蛋白不腊败表达,看对细胞功能有怎样的影响。如果要研究蛋白质不同结构域的功能可以利用酶切或者用质粒构建等方法表达蛋白质的片段来看蛋白质不同结构域对功能的影响。
    这个过程中也离不开Western,质谱(Mass Spectrum)这些技术的辅助。
    这些技术原理都比较好理解,实际做还是比较复杂的,可以看看Wikipedia和相关书籍。具体策略制定还是看你的具体需要了。
  2. 答:我觉得首先从他的来源、组成、功能和特性上考虑,比艾滋病TAT蛋白和酵母双杂交GAL4等。
问:如何研究蛋白质功能
  1. 答:先做蛋白质的同源性分析,结构预测,motif分析等,如果有线索就好办了。
    如果没有,可以寻找悔州相互作用蛋白竖前困,如yeast、IP、TAP等。或者做不同生长阶段,不同条件下的表达分析,wb,余念2d等。过表达、KO,做2d。

本文来源: https://www.lw26.cn/article/5b0315523637b328c85c1da2.html