一、一氧化氮合酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义（论文文献综述）
杜欣[1]（2021）在《牛黄及其有效成分对神经血管单元的保护作用研究》文中认为目的:观察牛黄及其有效成分对体外脑神经血管单元的保护作用,阐明牛黄及其有效成分治疗缺血性中风的内在生物学机制。方法:1.体外脑神经血管单元模型的建立以及缺氧/复氧模型的建立（1）利用体外原代细胞培养技术,提取大脑皮质神经元、星形胶质细胞和微血管内皮细胞,进行细胞鉴定;（2）利用transwell板将三种细胞共培养,构建体外脑神经血管单元的模型,利用TEER值,判定模型是否成功;（3）采用缺氧1h,复氧24h,构建OGD/R模型,利用TEER值、荧光素钠渗透系数判定模型是否成功。2.牛黄及其有效成分对三种细胞的毒性利用不同浓度的牛黄（Bezoar）、牛磺酸（Taurine）、牛黄熊去氧胆酸（TUDCA）和熊去氧胆酸（UDCA）,作用于神经元、星形胶质细胞和内皮细胞,分别干预24h和48 h,利用CCK8检测细胞活力,检测每种不同浓度的药物对细胞的毒性。3.牛黄及其有效成分对脑神经血管单元的保护作用（1）通过OGD/R模型,检测牛黄、牛磺酸、TUDCA和UDCA的不同剂量对细胞的作用,利用CCK8法检测细胞活力,确定每种药物的最佳剂量;（2）利用药物的最佳剂量进行干预,通过检测血脑屏障的通透性:TEER值、荧光素钠渗透系数和γ-GT;炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β;氧化应激指标SOD、NO、MDA以及神经元凋亡率。（3）牛黄对脑神经血管单元的保护机制研究加入抑制剂LY294002,检测牛黄对细胞的干预是通过PI3K/AKT通路实现的;检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3,金属蛋白酶MMP2、MMP9,紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5 以及 HIF-1α、VEGF、PI3K、AKT、p-AKT。4.不同配伍组分对脑神经血管单元的保护作用（1）利用OGD/R模型,筛选牛磺酸+牛磺熊去氧胆酸（T+T）,牛磺酸+熊去氧胆酸（T+U）的最佳剂量;（2）利用药物的最佳剂量进行干预,通过检测血脑屏障的通透性:TEER值、荧光素钠渗透系数和γ-GT;炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β;氧化应激指标SOD、NO、MDA以及神经元凋亡率。5.配伍组分牛磺酸和熊去氧胆酸对脑神经血管单元的作用机制利用T+U的最佳剂量,进行OGD/R的造模,检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3,金属蛋白酶 MMP2、MMP9,紧密连接蛋白 ZO-1、Occludin、Claudin-5 以及 NF-κBp65,p-P65,IKBα,p-IKBα 蛋白表达。6.配伍组分牛磺酸和牛磺熊去氧胆酸对脑神经血管单元的作用机制利用T+T的最佳剂量,进行OGD/R的造模,检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3,金属蛋白酶MMP2、MMP9,紧密连接蛋白 ZO-1、Occludin、Claudin-5,CA43、AQP4以及 P38MAPK,P-P38MAPK。结果1.获得了纯度较高的神经元、星形胶质细胞和内皮细胞（1）神经元培养7d后成熟,经MAP2免疫荧光鉴定,纯度大于95%;（2）星形胶质细胞培养7d后成熟,经GFAP免疫荧光鉴定,纯度大于95%;（3）内皮细胞培养7d后成熟,经Ⅷ因子免疫荧光鉴定,纯度大于95%。2.利用transwell,建立了脑神经血管单元的模型（1）该模型的电阻值在3-5天趋于平稳;（2）三细胞共培养,三种细胞的状态和单细胞相比,更佳。3.成功复制OGD/R模型利用缺氧1h,复氧24h,能够成功复制OGD/R模型,和正常组相比,模型组电阻值降低,荧光素钠渗透系数升高,能够进行下一步的实验研究。4.筛选药物毒性利用不用浓度的牛黄、牛磺酸、牛磺熊去氧胆酸和熊去氧胆酸分别干预24h和48h,筛选药物的毒性。5.筛选药物的保护剂量利用无毒性的各种药物浓度,通过OGD/R造模方法,检测细胞活力,筛选出保护作用的最佳剂量。6.牛黄及其有效成分对体外脑神经血管单元的保护作用（1）牛黄及其有效成分降低LDH,升高γ-GT,提高TEER值和降低荧光素钠渗透系数;（2）牛黄及其有效成分减少炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1 β的水平;（3）牛黄及其有效成分降低NO、MDA的水平,升高SOD的水平;（3）牛黄及其有效成分抑制神经元的凋亡;（4）牛黄降低MMP2、MMP9的蛋白表达;（5）牛黄能升高紧密连接蛋白的表达,提高ZO-1、Occludin、Claudin-5的蛋白表达;（6）牛黄通过HIF-α/VEGF,PI3K/AKT通路,发挥保护NVU的作用,牛黄降低HIF-1α、VEGF的蛋白表达水平,升高PI3K、AKT的蛋白表达水平。7.不同配伍组分对脑神经血管单元的保护作用（1）筛选了配伍组分的最佳剂量,T+T的最佳剂量1mM Taurine和1μM TUDCA,T+U的最佳剂量1mM Taurine和1μM UDCA;（2）T+T、T+U有效保护血脑屏障,降低TEER值,降低荧光素钠渗透系数,升高γ-GT;（3）T+T、T+U有效减轻细胞损伤,降低LDH的水平;（4）T+T、T+U有效减轻炎症反正,降低TNF-α、IL-6、IL-1β的值;（5）T+T、T+U有效抑制氧化反应,降低NO、MDA的水平,升高SOD的活力;（6）T+T、T+U抑制神经元的凋亡率。8.配伍组分牛磺酸和熊去氧胆酸对脑神经血管单元的作用机制（1）T+U抑制神经元的凋亡率;（2）T+U 提高 ZO-1、Occludin、Claudin-5 的蛋白表达;（3）T+U降低MMP2、MMP9的蛋白表达;（4）T+U降低Bax、Caspase-3蛋白表达,升高Bcl-2蛋白表达;（5）T+U降低MyD88、P-P65、P-IKB α的蛋白表达,通过MyD88/NF-κB信号通路发挥脑保护作用。9.配伍组分牛磺酸和牛黄熊去氧胆酸对脑神经血管单元的作用机制（1）T+T抑制神经元的凋亡率;（2）T+T 提高 ZO-1、Occludin、Claudin-5 的蛋白表达;（3）T+T降低MMP2、MMP9的蛋白表达;（4）T+T降低Bax、Caspase-3蛋白表达,升高Bcl-2蛋白表达;（5）T+U降低AQP4、P38MAPK,升高CX43的蛋白表达。结论（1）牛黄、牛磺酸、TUDCA和UDCA能够减轻炎症反应,降低氧化应激的水平,抑制神经元的凋亡发挥神经保护的作用;（2）牛黄通过HIF-1α/VEGF和PI3K/AKT通路发挥脑保护作用;（3）牛磺酸和牛磺熊去氧胆酸,牛磺酸和熊去氧胆酸配伍,发挥协同作用,比单独使用牛磺酸药效更好;（4）牛磺酸和熊去氧胆酸1000:1的配伍能够抑制炎症反应,降低氧化应激的水平,保护血脑屏障,抑制神经元的凋亡,能够抑制通路MyD88/NF-κB通路发挥脑保护作用（5）牛磺酸和牛磺熊去氧胆酸1000:1的配伍能够抑制炎症反应,降低氧化应激,保护血脑屏障,能够抑制P38MAPK通路,发挥脑保护作用;
米秋霖[2]（2020）在《芪灯明目胶囊对慢性高眼压大鼠模型眼压的影响及视神经保护的研究》文中指出目的:通过巩膜上静脉烙闭法建立大鼠慢性高眼压青光眼模型,探究芪灯明目胶囊对慢性高眼压青光眼大鼠的降眼压作用以及视网膜、视网膜神经节细胞、视网膜活性氧和Caspase-3的影响,为临床治疗青光眼提供理论依据。方法:随机选取SD大鼠48只,随机分为模型组、阳性对照组、高剂量用药组和低剂量用药组,每组各12只。术前3天开始测量大鼠眼压,作为基线眼压,以右眼作为模型眼,烙闭其3条巩膜上静脉,于术后即刻、1-3天、用药第1天、第4天、第7天、第10天、第14天、第17天、第21天测量眼压。用药组在造模成功后给予不同浓度芪灯明目胶囊混悬液灌胃（高剂量组浓度为900mg/kg,低剂量组浓度为600mg/kg）,阳性对照组用醋甲唑胺混悬液灌胃（2.23mg/kg）,模型组用等量灭菌生理盐水灌胃,每日1次,连续灌胃21天。灌胃结束后处死大鼠,取其眼球,观察其RGCs层及全层视网膜厚度、视网膜ROS的表达、RGCs的凋亡以及Casepase-3的表达。结果:1.用药第1天,各组间眼压值无差异（P>0.05）,用药第7、14、21天,模型组相较于高剂量组、低剂量组、阳性对照组眼压值更高,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组相较于低剂量组,差异有统计学意义（P<0.05）;其中,用药第7天,阳性对照组相较于高剂量组与低剂量组,差异无统计学意义（P>0.05）,用药第14天,阳性对照组与高剂量组眼压值比较有差异（P<0.05）,与低剂量组眼压值比较无差异（P>0.05）;用药第21天,阳性对照组与高剂量组、低剂量组眼压值都有差异（P<0.05）,但与低剂量组眼压值差异更小。2.模型组RGCs层厚度相较于空白对照组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组更薄,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组RGCs层厚度相较于低剂量组度更厚,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组视网膜全层厚度相较于空白对照组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组更薄,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组视网膜全层厚度相较于低剂量组更薄,差异有统计学意义（P<0.05）。3.模型组中RGCs凋亡率、视网膜ROS的含量以及Caspase-3的表达相较于空白对照组、阳性对照组、高剂量组以及低剂量组更高,差异有统计学意义（P<0.05）高剂量组RGCs凋亡率、视网膜ROS的含量以及Caspase-3的表达相较于低剂量组没有差异（P>0.05）。结论:1、不同剂量组芪灯明目胶囊混悬液均可降低慢性高眼压青光眼大鼠的眼压。2、芪灯明目胶囊混悬液可以降低慢性高眼压大鼠的视网膜损害,减少RGCs凋亡,减少视网膜中ROS含量,并且下调Caspase-3的表达,对青光眼视神经有保护作用。
常威[3]（2020）在《西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究》文中研究指明目的:研究西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:将健康成年雄性Wistar大鼠21只,年龄8-10周龄,重量在240260g,采用随机数字法分成3组,每组7只,分别为假手术组（Sham组）,缺血再灌注组（IR组）,西地那非预处理组（Slid组）。Sham游离双侧肾蒂,切除左肾;Slid组于麻醉前30分钟按体重1ml/kg腹腔注射西地那非,Sham组和IR组于麻醉前30分钟按体重1ml/kg腹腔注射生理盐水;Sham组和IR组游离双侧肾蒂,用动脉夹将右侧肾蒂夹闭45分钟,于松开动脉夹前5分钟结扎左侧肾蒂并切除左肾。于再灌注24小时后处死大鼠,收集血液标本和肾脏组织;分离血清,检测血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平,将右肾组织沿冠状面切开肾脏,一半肾脏组织置于4%多聚甲醛中固定,行石蜡包埋,切片做HE染色观察肾组织形态;另一半肾组织沿肾门放射状切成3份,分别检测肾组织中过氧化物歧化酶（SOD）活力,qRT-PCR检测肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3的基因表达水平;Western Blot检测肾组织中Caspase3的蛋白表达。结果:1.与Sham组相比,IR组和Sild组,BUN和Cr水平显着增高,P<0.05;而与IR组相比,Sild组Cr及BUN水平明显下降,P<0.05;2.与Sham组相比,IR组和Sild组,SOD水平显着降低,P<0.05;而与IR组相比,Sild组SOD水平明显增高,P<0.05;3.与Sham组相比,IR组和Sild组,Bcl2、Bcl2/Bax mRNA表达水平降低,Caspase3 mRNA表达水平升高,P<0.05;而与IR组相比,Slid组Bcl2、Bcl2/Bax mRNA表达水平明显升高,Caspase3 mRNA表达水平明显降低,P<0.05;4.与Sham组相比,IR组和Sild组,肾组织中Caspase3蛋白含量明显增加,P<0.05;而与IR组相比,Slid组肾组织中Caspase3蛋白含量降低,P<0.05;5.HE染色观察肾组织损伤情况,IR组比Slid组肾组织病理损伤变化明显。结论:西地那非预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤具有保护作用。
陈前波[4]（2019）在《阿克苷通过miR-342-3p/OPTN分子轴及下游PI3K/AKT信号通路调控RGC-5细胞自噬和凋亡的作用机制研究》文中研究指明[背景]青光眼（glaucoma）是一组以特征性视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病,病理性眼压增高是其危险因素,其中最核心的问题是青光眼性视神经病变。作为继白内障之后全球第二位致盲眼病,青光眼严重威胁着人类的视觉健康。因为一些体内、外不良因素的诱导或刺激造成眼压的升高或大幅度波动,如果眼压的变化超过了眼球内组织,尤其是视网膜视神经所能承受的限度,将给眼内组织尤其是视神经及其视觉通路和视觉功能带来损害,最典型和最突出的表现是视盘的凹陷性萎缩和视野的特征性缺损缩小。如不及时采取有效的治疗,视野可以全部丧失终至失明。青光眼视神经损害临床上表现为特征性的视神经萎缩,是神经节细胞轴突变性的直接表现,所有类型青光眼的主要病理学特征都是视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）的死亡。长期以来青光眼的发病机制可以归纳为两大类:机械压力学说和血管缺血学说。机械压力学说强调眼压作用,认为眼压升高引起筛板各层变形移位产生剪切力,使视网膜神经节细胞（RGCs）轴浆流阻滞于筛板区,轴突蛋白的生成和转运减少阻碍了脑源性神经营养因子的获得,最终导致RGCs凋亡。而血管缺血学说认为,由于各种原因引起视乳头微循环障碍,导致视乳头及其周围组织营养物质供应减少,RGCs轴突即视神经纤维缺血缺氧并最终凋亡。由于RGCs破坏后不能再生,RGCs的死亡将导致视力的永久性丧失。临床上青光眼的治疗主要采用降眼压类药物或手术方式,其主要目的在于控制眼压,然而部份患者虽然眼压控制良好,但视野仍然出现进行性丢失并最终导致盲。由此可见单纯的降低眼压并非能完全控制青光眼患者RGCs的丢失。随着对青光眼视神经损伤机制和病理生理过程的深入研究及认识,在临床治疗中尽早的采取抑制RGCs死亡,促进神经修复和视神经保护的治疗措施,成为改善视神经病变患者视力的重要途径,得到了临床医生的高度重视,已成为目前视神经保护研究的重点及难点。阿克苷（C29H36015）是苯丙素总苷的主要成分,来源于云南苦丁茶。本课题组前期研究发现,阿克苷对损伤模型RGCs具有保护作用。在大鼠慢性高眼压模型和视神经钳夹伤模型中,给予阿克苷治疗后,RGCs数量较对照组有明显的增加,同时RGCs特异性标志物Thy-1的表达水平也显着高于对照组,证明了阿克苷可以减少RGCs凋亡。在大鼠视网膜再灌注损伤模型中,阿克苷能促进细胞形态恢复,减少RGCs凋亡,减轻视网膜缺血再灌注损伤。为了进一步研究阿克苷对RGCs的保护作用,我们发现缺血再灌注损伤后阿克苷显着下调RGCs的LC3和Beclin-1的表达,上调p62蛋白表达。同时,应用阿克苷联合自噬抑制剂3MA作用于RGCs细胞,发现阿克苷可以下调OPTN的表达并抑制LC3的表达,而自噬激动剂雷帕霉素（Rampamycin）可以上调OPTN的表达。说明阿克苷可能通过下调OPTN自噬受体从而抑制自噬。但阿克苷是怎样通过OPTN调控RGCs细胞的自噬?有待进一步研究。[目的]在体外水平探究阿克苷调控细胞自噬对视网膜神经节细胞RGC-5的保护作用,及其分子机制。[方法]1、体外培养RGC-5细胞,采用浓度梯度的CoCl2处理,构建RGC-5细胞氧化应激损伤模型。用0、10、20、40、80、160、320 μmol/L的CoCl2处理细胞,探索构建损伤细胞模型的合适浓度。采用高中低三种不同浓度的阿克苷处理氧化应激损伤的RGC-5细胞,检测阿克苷对CoCl2损伤的RGC-5细胞的保护作用。2、应用CCK-8、透射电镜及流式细胞仪检测阿克苷对RGC-5细胞增殖、自噬和凋亡的作用。3、Affymetrix microRNA表达谱芯片检测阿克苷促进RGC-5细胞损伤修复过程中miRNA的差异表达。将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。经离心、清洗、接种并放于培养箱中培养。当传代培养使用时清洗后以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,混和均匀后,补足3n（n为传代瓶数）ml培养基（MEM）,依稀释比例转移至新的培养瓶中,并放入CO2培养箱培养。按照Affymetrix microRNA表达谱芯片提供的杂交操作流程采用相应的杂交Gene Chip Hybridization Wash and Stain Kit试剂盒对RNA样品和芯片进行杂交结合,根据试剂盒操作说明;配制杂交反应液,加入到上述生物素标记的样品中;采用Gene Chip-Scanner-3000 进行结果扫描,以及 GeneChip Command Console Software5.0读取结果。4、差异miRNA（miR-342-3p）与其靶基因OPTN的靶向作用关系检测。应用双荧光素酶报告基因检测miR-342-3p与OPTN的靶向作用。构建用于双荧光检测的野生型和突变型OPTN重组质粒（pmirGLO-OPTN-WT/MUT）,与miR-342-3p mimics共转染到HEK293T细胞,对照组用miR-342-3p scramble阴性对照与OPTN的野生型或突变型重组质粒共转染。按荧光素酶活性检测试剂盒（Promega）操作说明,检测荧光相对强度。5、miRNA-342-3p与OPTN的过表达或敲降转染。采用miR-342-3p mimic或inhibitor对miRNA-342-3p进行过表达或敲降转染;采用pcDNA3.1-OPTN重组质粒或OPTN敲降序列sh-RNA-OPTN对OPTN进行过表达或敲降转染。其中,miR-342-3p的过表达或敲降转染以miR-scramble为对照;OPTN的过表达转染以空载质粒作为对照,敲降转染以nonsence shRNA转染作为对照;每组转染实验组设置NC对照,每个实验组设3个复孔。6、应用 qRT-PCR、Western blotting 检测 RGC-5 细胞中 miR-342-3p 与 OPTN 表达的影响。离心后收集各组细胞,采用Trizol法裂解和抽提各组RRGC-5细胞的中的总RNA。应用逆转录试剂盒进行逆转录,并采用SYBR Green Master Mix实时荧光定量PCR试剂盒进行相对表达检测。应用Western blotting检测阿克苷对RGC-5细胞中OPTN的表达情况。7、应用Western blot实验和免疫荧光实验和检测RGC-5细胞中PI3K/AKT/mTOR通路及自噬相关蛋白表达的影响。提取细胞总蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳,Western blot反应检测RGC-5中PI3K/AKT信号通路及自噬相关蛋白（Beclin-1、Soluble-p62、Insoluble-p62、LC3-Ⅰ/Ⅱ）、细胞凋亡相关蛋白（caspase3 和 caspase7）等的表达。制备细胞爬片,4%多聚甲醛固定,免疫荧光检测自噬标志Beclin-1、LC3Ⅱ的表达。[结果]1、阿克苷对RGC-5细胞损伤的保护作用。用30μmol/L的CoCl2干预RGC-5细胞24h构建RGC细胞损伤模型显着抑制了 RGC细胞的增殖活力,促进细胞的凋亡水平。电镜检测结果表明,CoCl2损伤组RGC-5细胞的自噬水平显着升高,自噬小体的含量显着高于正常细胞组,Westernblot和免疫荧光检测结果表明,损伤组细胞Beclin-1的表达显着上调,可溶性p62蛋白显着升高,不可溶性p62明显降低,Ⅱ型LC3蛋白的转化也显着高于对照组。三组浓度的阿克苷处理均显着促进了 RGC-5细胞增殖活力、降低了细胞损伤后的自噬和凋亡水平。2、阿克苷显着上调RGC-5细胞中miR-342-3p的表达。microRNA Array 4.0芯片,对正常对照组、CoCl2损伤组、阿克苷处理组RGC-5细胞进行miRNAs表达分析结果表明,阿克苷组RGC-5细胞有64个miRNAs差异表达,上调的miRNAs有41个,上调倍数最大的是miR-342-3p,上调倍数为4.65。3、敲降miR-342-3p显着降低了阿克苷对RGC-5细胞的保护作用。与阿克苷组相比,阿克苷+敲降miR-342-3p组显着降低了 RGC-5细胞的增殖活力促进了 RGC-5细胞的自噬和凋亡水平。免疫荧光和Western Blot检测自噬相关蛋白发现敲降miR-342-3p组RGC细胞Beclin-1的表达显着上调,可溶性p62蛋白显着升高,不可溶性p62明显降低,Ⅱ型LC3蛋白的转化水平升高。4、miR-342-3p靶向负调控OPTN的靶向作用。starBase数据库的预测结果表明,OPTN可能是miR-342-3p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验结果表明,OPTN野生型载体中,对照组与miR-342-3pmimics组RGC-5细胞的荧光素酶活性分别为 10.044±0.462、4.820±0.284（t=5.685,P=0.008）;而 OPTN 突变型载体中,对照组与miR-342-3p mimics组RGC-5细胞的荧光素酶活性分别为10.015±0.439、9.957±0.514（t=0.402,P=0.859）。5、阿克苷通过miR-342-3p/OPTN分子轴调控RGC-5细胞增殖、自噬及凋亡。与损伤模型组（NC组）RGC-5细胞相比,过表达OPTN组RGC-5细胞的增殖活力受到显着抑制、细胞的凋亡和自噬水平进一步显着升高;与阿克苷组相比,阿克苷+过表达OPTN组显着降低了阿克苷对损伤细胞的保护作用,阿克苷+过表达miR-342-3p+过表达OPTN组与阿克苷组的检测结果在细胞增殖活力、凋亡和自噬方面无明显差异。6、阿克苷通过激活PI3K/AKT/mTOR通路抑制RGC-5细胞自噬。Western blot结果显示,阿克苷或3-MA均能够单独同时激活PI3K和AKT,进而导致RGC-5细胞的自噬受到抑制。阿克甙处理显着降低了雷帕霉素诱导的细胞自噬。并且阿克苷与自噬抑制剂3-MA共同联用对细胞中自噬体的数量的降低作用与单独使用相比,具有更强的效果。7、阿克苷通过OPTN与PI3K/AKT/mTOR通路的协同作用抑制RGC-5细胞自噬而降低RGC-5细胞凋亡水平。[结论]1.阿克苷促进损伤的RGC-5细胞增殖,抑制RGC-5损伤导致的细胞自噬和凋亡2.阿克苷显着促进损伤的RGC-5中miR-342-3p的表达。3.阿克苷通过上调miR-342-3p/OPTN分子轴促进RGC-5细胞增殖,抑制细胞自噬及凋亡。4.阿克苷通过激活PI3K/AKT信号通路降低RGC-5细胞的自噬和凋亡。5.阿克苷通过促进OPTN和PI3K/AKT信号通路的协同作用,实现对RGC-5细胞的保护作用。
曹玲英,游志鹏,范慧敏[5]（2019）在《中药防治视网膜缺血再灌注损伤的研究进展》文中进行了进一步梳理视网膜缺血是全球失明的主要原因,与各种疾病如糖尿病视网膜病变、青光眼、中风、视神经病变和视网膜病变相关。视网膜阻塞引起血液、氧气和葡萄糖供应减少。如果不能及时恢复血液供应,会造成永久的损害导致细胞死亡和视力丧失。文章回顾了中药治疗视网膜缺血再灌注损伤的不同作用机制并加以总结,以期为中药治疗视网膜缺血再灌注损伤提供理论依据,指出了中药在眼科疾病治疗中的重要地位。
田根全[6]（2019）在《活血通络利水方对RIR大鼠视网膜神经纤维层厚度及AQP4，GLAST，GS表达的影响》文中研究表明目的观察活血通络利水方对急性视网膜缺血再灌注（retinal ischemia reperfusion,RIR）损伤模型大鼠的视网膜神经纤维层的保护作用,以及对水通道蛋白-4（Aquaporin-4,AQP4）、L-谷氨酸/L-天冬氨酸转运体（L-gluta-mate/Laspartate transporter,GLAST,也称EAAT1）以及谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase,GS）表达的影响。方法实验一:25只BN雄性大鼠,随机抽取5只,造高眼压模型,用光学相干断层扫描仪（OCT）观察5只BN大鼠视网膜的神经纤维层厚度随时间的变化情况,找出其变化规律;根据上述实验结果,选择6小时和8周为两个时间观察点,将20只BN雄性大鼠,随机分为4组,分别为正常对照组,模型对照组、中药对照组、银杏叶片对照组,造模给药,然后用OCT观察4组BN大鼠视网膜的神经纤维层厚度随时间的变化情况,来检测中药和银杏叶片的效果。实验二:28只SD雄性大鼠随机分为7组,第一组是正常对照组,其余6组为模型对照组,模型对照组分别选取造模后6小时、12小时、1天、3天、1周、2周的6个时间点的大鼠。然后按6个时间点麻醉处死提取视网膜组织,进行West Blot实验,找出AQP4、GLAST以及GS表达最显着的时间点。2根据上述结果,选择造模后6小时为时间观察点;将16只SD雄性大鼠随机分为4组,为模型对照组、中药对照组、银杏叶片对照组,造模给药6小时后,进行麻醉处死大鼠,提取视网膜组织,进行West Blot实验,从而对比正常对照组、模型对照组、中药对照组、银杏叶片对照组之间AQP4、GLAST以及GS的表达高低的变化关系。结果实验一:1在6小时的时候,神经纤维层厚度增强,表示现在还处于水肿期,而在4周、8周、12周时厚度降低,表明大鼠的由于高眼压造成了神经纤维层的变薄。2采用中药和银杏叶干预后,发现在6小时时其神经纤维层厚度变薄;8周时神经纤维层厚度变薄程度减轻。实验二:1在AQP4、GLAST以及GS表达最显着的时间点为6h,其余时间点比较无显着意义。2在6h时,模型对照组视网膜组织中的AQP4表达最低,中药组与银杏叶片对照组AQP4表达高于模型对照组,但是低于正常对照组,中药组和银杏叶片对照组的差异无显着意义;中药组与银杏叶片对照组GLAST与GS表达低于模型对照组但是高于正常对照组,中药组和银杏叶片对照组的差异无显着意义。结论1活血通络利水方能减轻视网膜缺血再灌注损伤的视网膜初期的水肿程度和视网膜视神经纤维层厚度;长期观察能减少视神经纤维层变薄,保护视神经。活血通络利水方能提高视网膜缺血再灌注损伤AQP4、GS和GLAST的表达水平和活性,从而起到保护视网膜组织的作用。2活血通络利水方能提高视网膜缺血再灌注损伤后AQP4、GS和GLAST的表达水平和活性,从而保护视网膜组织。图5幅;表9;参81篇。
李世鹏[7]（2019）在《天麻素调控小胶质细胞抗大鼠脑缺血再灌注损伤机制研究》文中认为[研究背景]脑卒中在全球范围内是仅次于缺血性心脏病的第二大致死原因。随着中国经济发展和生活方式的改变,脑卒中已成为我国国民的第一致死疾病,其中缺血性脑卒中占到了卒中总数的69.6%-77.8%,给社会和家庭带来严重损失和沉重经济负担。急性脑卒中主要治疗方式还是早期rt-PA溶栓或机械取栓使得血管再开通。但受制于3-4.5 h较短的时间窗,和血管再通后缺血再灌注损伤带来的脑水肿、颅内出血和出血转化等并发症,其治疗效率有待进一步提升。寻找合适的神经保护剂治疗脑缺血再灌注损伤配合早期的血管开通是近年来的治疗急性缺血性脑卒中的研究热点之一。脑缺血再灌注损伤主要发病机制包括能量耗竭、炎性反应、氧自由基损伤、钙离子超载、一氧化氮和一氧化氮合酶的作用、兴奋性氨基酸毒性以及血脑屏障破坏及细胞坏死调亡等。其中,血脑屏障破坏和炎性反应在缺血再灌注病理过程中起到关键作用。小胶质细胞作为神经血管单元的组成细胞,在维持血脑屏障结构完整和功能维持以及神经炎症的启动和调控方面都起到了重要作用。天麻素是传统中药天麻的主要有效单体成分之一,目前在临床应用广泛,可通过抗氧化应激、抗神经炎性反应、调节神经递质、调节神经重构、抗凋亡抗自噬等多途径在多种神经系统疾病中发挥神经保护作用。目前关于天麻素在缺血再灌注损伤中对血脑屏障的保护和对小胶质细胞缺血再灌注损伤导致的神经炎症的调控机制现在尚未有深入研究。因此,本研究通过构建体内外缺血再灌注模型,研究天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经行为、梗死体积的保护作用,评估天麻素对血脑屏障及相关蛋白的影响,从细胞层面探讨天麻素对小胶质细胞在缺血再灌注损伤导致的神经炎症的调控和机制。为缺血性脑卒中的治疗提供一个新的可能治疗靶点和治疗思路。第一部分天麻素预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用[目 的]本实验部分建立SD大鼠缺血再灌注体内实验模型和BV-2小胶质细胞OGD/R体外模型,通过天麻素预处理,观察天麻素对缺血再灌注损伤大鼠的神经行为、梗死体积、脑含水量的作用,评估天麻素对血脑屏障影响,研究天麻素在体内外小胶质细胞中对血脑屏障损伤相关蛋白的调控。[方 法]通过线栓法制作SD大鼠MCAO模型来建立缺血再灌注体内实验部分动物模型;通过BV-2小胶质细胞氧糖剥夺再灌注在体外模拟细胞缺血再灌注损伤过程。使用各剂量天麻素（体内50mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg,体外20 μmol/L、40 μmol/L、80 μmol/L）预处理,并同阳性对照尼莫地平（NIM）及阴性对照组比较。使用Garcia JH评分评估各组神经行为学变化;使用TTC染色测量脑组织梗死体积,通过测量脑组织EB渗漏量和脑组织含水量以及HE染色检测反映血脑屏障通透性的变化,通过Western blot和免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织和小胶质细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP2）和基质金属蛋白酶-9（MMP9）,以及水通道蛋白-4（AQP4）和闭锁小带蛋白-1（ZO-1）的变化。[结 果]1.不同浓度GAS和NIM预处理的MCAO大鼠神经功能评分较MCAO组明显改善（P<0.001）。各治疗组中GAS 100mg/kg组评分最高。2.同MCAO组相比,GAS 100 mg/kg组和GAS 200 mg/kg组脑组织梗死体积明显减少（P<0.001）。3.MCAO组EB的渗漏明显增加,天麻素各治疗组和NIM组的EB渗漏量较MCAO组明显减少（P<0.01,P<0.001）。其中GAS 100 mg/kg组减少趋势最明显。4.MCAO组脑组织含水量明显升高,GAS 100 mg/kg能明显降低IRI脑组织含水量（P<0.01）。5.Western blot结果显示MCAO组IRI72 h后MMP2和MMP9、AQP4的表达显着增加（P<0.01）,而ZO-1的表达减少（P<0.01）,同时在 GAS 治疗（100mg/kg）组和 NIM 治疗（4mg/kg）组中 MMP2和MMP9、AQP4的表达较MCAO组显着减少（P<0.01）,而ZO-1的表达增加。免疫荧光显示在脑组织小胶质细胞中也有类似的趋势。6.Western blot显示BV-2细胞OGD/R各时间点中3 h和6 h时间点各蛋白变化程度最明显,GAS 40μmol/L、80 μmol/L在3 h时均能抑制MMP2和MMP9、AQP4在OGD/R后升高趋势,同时能增加ZO-1的表达。[结 论]1.SD大鼠脑缺血后再灌注72h时间点仍存在神经功能缺损,血脑屏障通透性增加和脑含水量增加。2.天麻素预处理能明显改善MCAO大鼠再灌注72 h时的神经功能,减少脑梗死体积和血脑屏障通透性。3.天麻素100mg/kg在大鼠体内和40 μmol/L在体外能抑制小胶质细胞MMP2,MMP9和AQP4,增加ZO-1表达从而发挥其在MCAO和OGD/R模型中对缺血再灌注损伤的保护作用。第二部分天麻素对缺血再灌注损伤后小胶质细胞中SOX4的调控[目 的]本实验部分通过构建缺血再灌注损伤动物模型及细胞模型,使用Western blot及免疫荧光观察检测缺血再灌注损伤后体内体外小胶质细胞中SOX4蛋白变化。同时通过天麻素干预缺血再灌注损伤动物模型及细胞模型,探讨研究天麻素对小胶质细胞中SOX4表达的影响。并用天麻素干预SOX4过表达的BV-2细胞,检测SOX4过表达BV-2细胞中MMP2和MMP9、AQP4、ZO-1表达的变化,研究天麻素对缺血再灌注损伤的保护机制。[方 法]通过线栓法制作SD大鼠建立脑缺血再灌注动物模型;提取和纯化大鼠原代小胶质细胞并培养传代;通过BV-2小胶质细胞和原代小胶质细胞OGD/R在体外模拟缺血再灌注损伤过程。将实验动物和细胞分为对照组,模型组和天麻素干预组,体外部分分别使用GAS50mg/kg、GAS 100mg/kg、GAS200 mg/kg,体内部分分别使用 GAS 20 μmol/L、GAS 40 μmol/L、GAS 80 μmol/L 对实验模型将进行预处理。通过Western blot和免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织和两种小胶质细胞株中SOX4的基础表达,和在MCAO、OGD/R刺激后以及GAS干预后SOX4的表达变化。构建SOX4过表达和空载的质粒,用慢病毒载体系统包装带有GFP荧光标记的SOX4过表达质粒和对照空载质粒,建立SOX4慢病毒稳定感染BV-2细胞系和对照空载病毒稳定感染BV-2细胞系。天麻素干预转染细胞系OGD/R模型,Western blot和免疫荧光染色检测SOX4,MMP2和MMP9、AQP4、ZO-1表达的变化。[结 果]1.SOX4蛋白在BV-2永生小胶质细胞株和新生SD大鼠原代小胶质细胞中有基础表达,在SD大鼠胼胝体区小胶质细胞中也有少量表达。2.Western blot结果显示MCAO组IRI72 h后脑组织SOX4的表达增加（P<0.01）;同时GAS 100 mg/kg和GAS 200 mg/kg治疗可抑制SOX4增加的趋势,以100 mg/kg组明显。免疫荧光显示在脑组织小胶质细胞中也有类似的趋势。3.Western blot显示BV-2细胞和原代小胶质细胞中OGD/R后各时间点中3h时间点SOX4升高程度最明显,GAS 40 μmol/L能抑制OGD/R后3 h时SOX4升高趋势。4.GAS 40 μmol/L预处理能减少OGD/R BV-2小胶质细胞中SOX4、MMP2和MMP9、AQP4表达并且增加ZO-1的表达。在SOX4过表达细胞系中,GAS 40μmol/L预处理不能减少MMP2、MMP9、AQP4和增加ZO-1的表达。[结论]1.SOX4蛋白在BV-2永生小胶质细胞株和新生SD大鼠原代小胶质细胞中有基础表达,在SD大鼠胼胝体区小胶质细胞中也有少量表达。2.OGD/R以及MCAO能明显增加SOX4在体内外小胶质细胞中的表达,天麻素预处理能抑制SOX4增高的趋势。3.SOX4过表达能逆转GAS对OGD/R小胶质细胞中MMP2和MMP9、AQP4、ZO-1的影响,提示GAS可通过SOX4调控MMP2和MMP9、AQP4、ZO-1进而发挥神经保护作用。
曹玲英[8]（2019）在《枸杞多糖对大鼠缺血再灌注视网膜保护作用的实验研究》文中研究说明目的:（1）探讨枸杞多糖对大鼠视网膜缺血再灌注损伤是否有保护作用（2）枸杞多糖对大鼠视网膜缺血再灌注损伤保护作用可能的机制,为缺血再灌注损伤视网膜的治疗提供理论依据和新的诊治途径。方法:（1）把健康成年雄性SD大鼠55只作为实验对象,体重范围在200-300g,购自南昌大学动物科学研究所,数字表法随机分成空白对照组简称假手术组、缺血再灌注组简称模型组、缺血再灌注模型+枸杞多糖组简称LBP药物组,假手术组5只,其他两组每组25只,每组分总共5个时间点（6h、12h、24h、48h、72h、）,各时间点5只,在室温,给予充足食物与水,12h光照,12h黑夜下适应性生活7天。（2）LBP药物组SD雄性大鼠给与4ml/100g的枸杞多糖溶液灌胃处理（每天一次,连续一周）,模型组SD雄性大鼠和假手术组给与4ml/100g的0.9%氯化钠溶液处理（每天一次,连续一周）。（3）采取动脉夹夹闭大鼠右侧颈总动脉的方式制作视网膜缺血再灌注损伤模型。用动脉夹夹闭模型组、LBP药物组右侧颈总动脉（夹闭1小时）,假手术组只进行手术操作暴露右颈总动脉不夹闭1小时。1小时后逐层缝合切口。（4）分别在缺血再灌注后6h、12h、24h、48h、72h后处理各组SD大鼠,在腹腔注射10%水合氯醛溶液行深度麻醉下处死SD大鼠,制作眼球标本行HE染色,在显微镜下观察视网膜各层形态结构的变化,用免疫组织化学染色的方法检测各组大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达。结果:（1）HE染色结果:视网膜缺血再灌注后6小时,轻度视网膜水肿,视网膜厚度略有增加,神经纤维层和内丛状层水肿淡染,视网膜缺血再灌注后12,24小时,视网膜严重水肿,神经节细胞数减少,内核层较薄,细胞排列松散无序;48小时水肿消失,主要表现为视网膜神经节细胞数继续减少,内核层进一步变薄,可见空泡化;72小时视网膜变薄,视网膜细胞数量减少。与模型组（RIRI组）相比,药物组（LBP组）在6h和12h,24h时视网膜组织水肿缓解;24h,48h和72h较模型组神经节细胞减少较少,视网膜厚度无明显变化。药物组的视网膜各层结构基本上是排列有序的。（2）免疫组化结果:假手术组视网膜活性Caspase-3阳性细胞数为（103.12±12.97个）mm-2,模型组视网膜活性Caspase-3阳性细胞数在灌注后6h开始表达增多,阳性细胞数为（559.03?38.25）个·mm-2,24 h达到较高水平,阳性细胞数为（1528.12?52.74）个mm-2,随后逐渐下降,LBP药物组视网膜各时间点活性Caspase-3阳性细胞数均显着少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。假手术组视网膜可见大量Bcl-2阳性细胞,Bcl-2阳性细胞在缺血再灌注组RIRI后6h开始下降,12h后持续下降,24h下降至较低水平。在每个时间点,药物组中Bcl-2阳性细胞的数量显着高于缺血再灌注视网膜,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Bax阳性细胞在假手术组大鼠表达较少;在缺血再灌注组中,在RIRI后6小时在神经节细胞层和内核层中观察到Bax阳性细胞,并且在24小时达到更高水平,并且在48小时开始减少。在每个时间点,药物组中的Bax阳性细胞显着少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义（均为P<0.05）结论:（1）枸杞多糖对视网膜缺血再灌注损伤引起的视网膜损伤有保护作用。（2）其保护是抑制视网膜缺血再灌注损伤中的细胞凋亡,其机制是通过上调Bcl-2、下调Bax与Caspase-3表达有关。
叶宏[9]（2019）在《预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究》文中研究指明[目 的]观察自主跑轮预适应、缺血后适应以及两者联合应用对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用有无差异,结合氧化应激指标、细胞凋亡因子的检测,探寻可能的潜在调控机制。[方 法]实验由三个部分组成:第一部分实验动物小鼠分为5组:1.假手术组。2.脑缺血再灌注损伤模型组。3.缺血后适应组。4.自主跑轮预适应组。5.自主跑轮预适应联合后适应组。在第一部分实验结果的基础上设定第二部分实验分组:小鼠分为3组:1.假手术组。2.缺血后适应组。3.自主跑轮预适应联合后适应组。为验证第一、二部分的实验推论,将第三部分实验动物分为4组:1.缺血后适应组。2.自主跑轮预适应联合后适应组。3.自主跑轮预适应+后适应-PI3K抑制剂组。4.自主跑轮预适应+后适应-STAT3抑制剂组。实验采用神经功能缺损评分表,检测小鼠神经功能障碍评分;水迷宫检测认知功能;TTC实验检测脑梗死灶体积;分子生物学系列实验检测氧化应激生化指标以及神经元凋亡情况;细胞免疫的改变,采用Western blot检测凋亡、信号通路相关因子的蛋白表达。[结 果]第一部分实验:与脑缺血再灌注组比较,自主跑轮预适应改善小鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积的作用不明显,后适应显着改善小鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积,自主跑轮预适应联合后适应进一步增强改善小鼠脑缺血/再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积的作用,明显强于单独的预适应或后适应。与脑缺血再灌注组比较,预适应略有升高超氧化物歧化酶（SOD）活性和降低丙二醛（MDA）含量的作用,后适应能显着升高脑组织中SOD活性和降低MDA含量,自主跑轮预适应联合后适应,升高脑组织SOD活性,降低MDA含量的作用进一步增强,明显强于单独的自主跑轮预适应或后适应。与模型组比较,自主跑轮预适应减少缺血区脑组织的神经细胞凋亡数量不明显,后适应明显减少神经细胞凋亡数量,自主跑轮预适应联合后适应减少神经元细胞凋亡的作用进一步增强,明显强于单独的自主跑轮预适应或后适应。Western blot检测凋亡相关因子的蛋白表达,与脑缺血再灌注组比较,其中促凋亡因子Bax、Caspase-3的蛋白表达,预适应联合后适应的表达减弱,自主跑轮预适应或缺血后适应的表达无明显统计学意义;抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达,预适应联合后适应的表达增强,自主跑轮预适应或缺血后适应的表达无明显统计学意义。第二部分实验:Western blot检测信号通路相关因子的蛋白表达,其中PI3K、STAT3的蛋白表达,缺血后适应升高PI3K、STAT3活性。自主跑轮预适应和后适应联合干预提升PI3K、STAT3通路活性强于单独的后适应。第三部分实验:分别使用PI3K抑制剂LY294002、STAT3抑制剂SH454后,自主跑轮预适应联合后适应的脑保护作用明显减弱,表现为:神经功能评分降低,认知功能减退,脑梗死体积增大,TUNEL检测的凋亡细胞数量增多,促凋亡因子线粒体内细胞色素C、Bax、Caspase-3的蛋白表达增强,抗凋亡因子胞质内细胞色素C、Bcl-2的蛋白表达减弱。[结 论]1.后适应对小鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,自主跑轮预适应联合后适应能进一步增强上述作用。2.自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用的增强可能依赖于激活抗氧化、抗凋亡的PI3K和STAT3信号通路。3.分别使用PI3K、STAT3抑制剂后,自主跑轮预适应联合后适应的脑保护作用明显减弱。
方晓玲[10]（2019）在《二甲双胍保护心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究》文中指出第一部分二甲双胍保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用研究目的:探讨二甲双胍干预后对大鼠心肌缺血再灌注损伤的抵抗作用。方法:选取SPF级2日龄Wistar大鼠乳鼠40只,应用结扎前降支冠脉的方法构建心肌缺血再灌注损伤的大鼠模型,将大鼠分成三组:心肌缺血再灌组,假手术组和二甲双胍治疗组。在缺血30min和再灌注2小时检测各组指标并收集。各组大鼠的心肌梗死面积通过心肌染色法检测比较;应用HE染色方法观察心肌的病理学形态变化;应用全自动生化分析仪检测肌钙蛋白和肌酸激酶水平指标;应用WST-1法检测大鼠血浆SOD活力;应用微量酶标法检测大鼠血浆LDH活力;各组血清TNF-α和IL-6浓度通过ELISA方法检测比较,各组血浆MDA的浓度通过硫代巴比妥钠酸法（TBA）检测比较;大鼠心脏功能通过P-V导管监测系统评估比较。结果:1、HE染色显示缺血再灌注损伤组心肌细胞排列紊乱,胞浆肿胀,心肌纤维断裂溶解,间隙增宽伴有水肿,间质有大量炎性细胞浸润以及红细胞外渗;假手术组大鼠的心肌细胞排列整齐,包膜完整,间质中无红细胞和炎性细胞浸润;二甲双胍治疗组大鼠的心肌细胞排列稍紊乱,间质有少量炎性细胞浸润和少量红细胞外渗,二甲双胍治疗组大鼠心肌损伤程度比缺血再灌注组较轻。TTC染色结果显示假手术组大鼠心肌正常,未发生心肌梗死,二甲双胍治疗组大鼠的心肌梗死范围比缺血再灌注损伤组明显减少,差异有统计学意义（56.7±4.2%vs 30.2±3.6%,P<0.05）。2、缺血再灌注损伤组大鼠的肌钙蛋白（37.82±5.13ng/mL vs 4.33±0.70ng/mL）、心肌酶谱（160.53±27.41ng/mL vs 75.52±12.13ng/mL）、TNF-α（1.60±0.14ng/mL vs（0.68±0.10ng/mL））、IL-6（180.80±10.29ng/mL vs 76.18±8.19ng/mL）、乳酸脱氢酶（5908.38±784.47 U/L vs 2498.04±480.15 U/L）和MDA 含量（11.41±1.91nmol/m L vs 5.11±1.02nmol/mL）比假手术显着上升,SOD活性明显减少（76.49±10.61 U/mL vs 123.72±12.26 U/mL）,差异均具有统计学意义（P<0.05）;而二甲双胍治疗组大鼠的心肌酶谱（116.22±24.80ng/mL vs 160.53±27.41ng/mL）、肌钙蛋白（22.13 ±3.84ng/mL vs 37.82±5.13ng/mL）、TNF-α（1.02±0.12ng/mL vs 1.60±0.14ng/mL）、IL-6（128.47±9.68ng/mL vs 180.80±10.29ng/mL）、乳酸脱氢酶（4778.03±803.38 U/L vs 5908.38±784.47 U/L）和 MDA 含量（7.86±1.52nmol/mL vs 11.41 ±1.91nmol/mL）比缺血再灌注损伤组明显下降,SOD活性显着增加（105.81±14.78 U/mL vs 76.49±10.61 U/mL）,差异均具有统计学意义（P<0.05）。3、缺血再灌注损伤组在再灌注 1 周（EF:25.02%±2.31%vs 62.04%±4.24%,PRSW:42.01±3.69mmHg vs 119.03±6.11mmHg）和1 月（EF:39.01%±4.38%vs 60.00%±5.08%,PRSW:39.28±2.89mmHg vs 121.13±6.26mmHg）不同时间点的缺血再灌注损伤大鼠的每搏功-舒张末期容积关系即前负荷可补充的心室搏出功（PRSW）和左室射血分数（EF）比假手术组明显下降,与缺血再灌注损伤组相比,二甲双胍治疗组大鼠的PRSW（1周:96.04±5.77mmHg,1 月:106.45±5.75mmHg）和 EF 值（1 周:46.04%±3.12%,1 月:56.02%±4.82%）显着上升,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:二甲双胍能够减少心肌缺血再灌注损伤大鼠中的心肌损伤反应,血清炎症因子水平以及氧化应激反应,改善大鼠的心脏功能。第二部分二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡的作用研究目的:探讨二甲双胍对大鼠心肌缺血-再灌注损伤中心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法:随机选取Wistar大鼠乳鼠40只,在无菌操作条件下剪取心脏,大鼠心肌细胞通过原代培养,体外建立心肌细胞缺氧/复氧损伤（H/R）的模型。将大鼠分成4组:空白对照组、二甲双胍组、H/R组和二甲双胍+H/R组。各组原代大鼠心肌细胞的凋亡率通过TUNEL试剂盒检测比较;各组原代大鼠心肌细胞的活性通过CCK-8法检测比较;各组原代大鼠心肌细胞的HIF-1 α mRNA相对表达量通过Rea-time PCR检测;各组原代大鼠心肌细胞的Bcl-2和Bax蛋白相对表达量通过Western Blot检测比较。结果:与空白对照组[（6.8±1.4）%]相比,H/R组[（38.7±3.4）%]大鼠原代心肌细胞的凋亡率显着增加（P<0.001）,细胞活性明显降低（0.7±0.1 vs 1.5±0.4,P<0.001）;与H/R组相比,二甲双胍能显着减少心肌细胞凋亡率[（22.5±2.3）%vs（38.7±3.4）%,P<0.001],明显促进细胞活性（1.1±0.2 vs 0.7±0.1,P<0.001）;Real-time PCR检测结果显示HIF-1 α mRNA相对表达量在二甲双胍+H/R组大鼠心肌中显着减少（0.90±0.12 vs 2.21±0.52）,Western Blot检测结果显示Bcl-2蛋白相对表达量在二甲双胍+H/R组明显上升（0.7±0.2 vs 0.5±0.2）,Bax蛋白相对表达量明显减少（1.4±0.3 vs 1.8±0.4）,均具有统计学差异。结论:在大鼠缺血-再灌注损伤过程中,二甲双胍能够降低心肌细胞的凋亡,其作用机制可能是促进心肌细胞活性,减少HIF-1 α表达,以及增加凋亡抑制因子Bcl-2表达和减少Bax表达。第三部分二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞自噬功能的作用研究目的:探讨二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞心肌细胞自噬功能的影响。方法:采用结扎前降支冠脉的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,将大鼠分成如下3组:假手术组,对照组和治疗组。治疗组中的大鼠每天通过灌胃方式给予二甲双胍200mg/kg,治疗持续时间总共12周;以生理盐水作为对照。在术后4周、8周、12周的不同时间点上分别检测并收集大鼠的心脏彩超指标。全部大鼠在治疗12周后通过24h禁食后处死,检测各组大鼠心肌细胞自噬率;应用Western blot方法检测Cathepsin D和Beclin-1的蛋白表达水平。结果:超声心动图显示建模后4周心肌收缩功能减弱,二甲双胍组干预12周后的左室射血分数（1VEF）比对照组显着升高（0.716±0.002 vs 0.618±0.036,P<0.05）,而两组之间其他心脏彩超指标如收缩末期室间隔厚度（IVSs）、收缩末期左心室后壁厚度（LVPWs）、舒张末期室间隔厚度（IVSd）和舒张末期左心室后壁厚度（LVPWd）差异均无统计学意义。与对照组（39.15%±4.26%）相比,治疗组（21.65%±3.82%）心肌细胞自噬率明显降低（P<0.05）;对照组的Beclin-1和Cathepsin D蛋白表达（0.867±0.005和0.812±0.002）显着高于假手术组（0.223±0.002和0.327±0.002）,治疗组（0.412±0.002和0.646±0.003）则较对照组明显降低（P<0.05）.结论:二甲双胍能降低心肌细胞自噬发生,改善心肌缺血再灌注损伤的心脏收缩功能。第四部分二甲双胍对急性心肌梗死患者行PCI术后损伤的保护作用目的:探讨二甲双胍对急性心肌梗死后行PCI手术的效果以及可能的机制。方法:选择从2016年1月至2018年3月本院收治的急性心肌梗死进行PCI手术的80例糖尿病患者作为研究对象。根据心梗前服用二甲双胍药物情况将患者分为观察组（40例）和对照组（40例）,所有患者均给予常规治疗,对照组患者没有口服二甲双胍药物,观察组患者在心梗前口服过二甲双胍药物治疗,两组患者的治疗均为1个月,比较两组患者的PCI术后的心绞痛治疗效果,心绞痛持续时间和发作频率,血清炎症因子,心电图改善,心脏收缩功能和药物不良反应发生情况。结果:观察组患者的心绞痛治疗总有效率为92.5%,疗效明显高于对照组（72.5%）,具有统计学差异（P=0.039）;治疗1个月后,与对照组相比,观察组患者的血清炎症因子IL-6（18.58±2.69pg/mL vs 24.08±3.27 pg/mL）和TNF-α水平（129.75±21.68pg/mL vs 180.38±25.19pg/mL）明显降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月后,与对照组相比,观察组患者的心绞痛持续时间（5.7±1.3min/次vs 2.9±0.8 min/次）和发作频率（10.8±2.4次/周vs 2.5±0.6次/周）明显减少,具有统计学差异（P<0.05）;在心电图改善方面,观察组患者明显优于对照组,差异有统计学意义（90.0%vs 70.0%,P<0.05）;在心脏功能方面,观察组患者左室舒张末期内径（LVDD）明显小于对照组（52.07±5.46mmvs 54.77±5.69mm,P<0.05）,左室射血分数（LVEF）显着高于对照组（69.27%±6.05%vs 64.79%±5.75%,P<0.05）,均具有统计学差异。在总不良反应发生率方面,两组患者之间均无统计学差异。结论:心梗前应用二甲双胍能够使PCI手术治疗冠心病心绞痛疗效显着,并且不良反应少,能够改善心功能以及降低IL-6和TNF-a表达水平。
二、一氧化氮合酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、一氧化氮合酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义（论文提纲范文）
（1）牛黄及其有效成分对神经血管单元的保护作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 上篇文献综述 |
| 综述一 缺血性中风背景下的神经血管单元 |
| 1. 缺血性中风的研究现状 |
| 2. 神经血管单元的组成 |
| 3. 在正常和低氧条件下的生理学 |
| 4. 缺血性脑卒中的实验模型 |
| 5. 基于神经血管单元的治疗策略 |
| 6. 参考文献 |
| 综述二 中药抗缺血性脑卒中的研究进展 |
| 一. 植物药 |
| 1.1 人参 |
| 1.2 栀子 |
| 1.3 姜黄 |
| 1.4 丹参 |
| 1.5 黄芪 |
| 1.6 川芎 |
| 1.7 地黄 |
| 1.8 黄连 |
| 二. 动物药 |
| 2.1 牛黄 |
| 2.2 麝香 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 下篇 实验研究 |
| 实验一 “神经血管单元”体外模型的建立以及缺氧/复氧模型的建立 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 实验二 牛黄及其有效成分对单独培养的神经元、星形胶质细胞、内皮细胞的细胞毒性 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 牛黄及其有效成分对脑神经血管单元的保护作用 |
| 1. 实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 不同配伍组分对脑神经血管单元的保护作用 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 试验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 实验五 牛磺酸和熊去氧胆酸对神经血管单元的作用机制 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 试验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 实验六 牛磺酸和牛磺熊去氧胆酸对脑神经血管单元的作用机制 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 试验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）芪灯明目胶囊对慢性高眼压大鼠模型眼压的影响及视神经保护的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 实验一 :芪灯明目胶囊对慢性高眼压青光眼大鼠模型眼压的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要耗材与设备信息 |
| 1.3 试剂的配置 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 慢性高眼压大鼠模型的建立 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 眼压的测定 |
| 2.4 大鼠灌胃 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 慢性高眼压青光眼大鼠模型的建立结果 |
| 4.2 大鼠用药后各组眼压情况 |
| 5 小结 |
| 实验二 :芪灯明目胶囊对慢性高眼压大鼠模型视网膜、RGCS、ROS及 CASPASE-3 的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要耗材与设备信息 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 视网膜组织切片的制备 |
| 2.2 SD大鼠眼球组织的TUNEL检测 |
| 2.3 流式细胞仪测定SD大鼠视网膜ROS |
| 2.4 RT-PCR |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 视网膜厚度 |
| 4.2 RGCs层厚度 |
| 4.3 RGCs凋亡 |
| 4.4 视网膜中ROS含量 |
| 4.5 视网膜中Caspase-3 的表达 |
| 5 小结 |
| 讨论 |
| 1 西医对青光眼的认识 |
| 1.1 青光眼RGCs凋亡机制 |
| 1.2 治疗 |
| 2 中医对五风内障的认识 |
| 2.1 五风内障的分类 |
| 2.2 五风内障的病因病机 |
| 2.3 中医治疗五风内障 |
| 3 芪灯明目胶囊的研究 |
| 3.1 葛根 |
| 3.2 黄芪 |
| 3.3 灯盏细辛 |
| 3.4 芪灯明目胶囊复方的研究 |
| 4 大鼠慢性高眼压青光眼模型 |
| 5 高眼压对视网膜的影响 |
| 6 青光眼视网膜中ROS的变化 |
| 7 青光眼视网膜中CASPASE-3 的变化 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 中医药治疗青光眼的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附件1:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果(示例) |
（3）西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 背景回顾 |
| 1.1 肾缺血再灌注损伤 |
| 1.2 缺血再灌注损伤机制 |
| 1.2.1 线粒体功能障碍 |
| 1.2.2 超氧化物和ROS |
| 1.2.3 钙超载 |
| 1.2.4 内质网应激 |
| 1.3 五磷酸二酯酶抑制剂 |
| 1.3.1 西地那非概述 |
| 1.3.2 NO/cGMP信号通路 |
| 1.3.3 肾脏与NO/ cGMP通路 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验药品 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.1.5 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验动物分组 |
| 2.2.2 给药剂量与方法 |
| 2.2.3 给药剂量与方法 |
| 2.2.4 实验标本的采集和处理 |
| 2.2.5 测定血清Cr和BUN浓度 |
| 2.2.6 测定肾组织中SOD含量 |
| 2.2.7 测定肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3 基因表达水平 |
| 2.2.8 测定肾组织中Caspase3 蛋白含量 |
| 2.2.9 肾组织H-E染色 |
| 2.3 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 血清Cr和BUN浓度 |
| 3.2 肾组织中SOD含量 |
| 3.3 测定肾组织中Bcl2、Bax、Caspase3 基因表达水平 |
| 3.4 测定肾组织中Caspase3 蛋白含量 |
| 3.5 肾组织H-E染色结果 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 第六章 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
| 缩略词表 |
（4）阿克苷通过miR-342-3p/OPTN分子轴及下游PI3K/AKT信号通路调控RGC-5细胞自噬和凋亡的作用机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 青光眼 |
| RGC细胞与青光眼 |
| RGC细胞凋亡 |
| 青光眼发生发展中RGC细胞的自噬异常 |
| 自噬与细胞凋亡的关系 |
| 自噬水平异常影响RGC细胞的存活和凋亡 |
| 白噬相关通路 |
| mTOR信号通路 |
| PI3K信号通路 |
| LC3信号通路 |
| 阿克苷在神经损伤或退行性疾病中对神经细胞具有保护作用 |
| OPTN与RGC细胞自噬、凋亡及青光眼的发生发展相关 |
| 本研究意义 |
| 第一部份阿克苷(Acteoside)对视网膜神经节细胞的保护作用 |
| 1.实验方法 |
| 1.1 实验资料与材料 |
| 1.2 细胞复苏 |
| 1.3 细胞传代与培养 |
| 1.4 CoCl_2诱导RGC-5细胞氧化应激损伤模型的建立 |
| 1.5 实验分组及处理 |
| 1.6 CCK-8实验测定各组RGC-5细胞的增殖活力 |
| 1.7 透射电镜观察RGC-5细胞自噬小体的水平 |
| 1.8 免疫荧光实验检测OPTN或自噬相关蛋白的表达 |
| 1.9 流式细胞仪检测各组RGC-5细胞凋亡 |
| 1.10 实验数据处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 CoCl_2诱导RGC-5细胞氧化应激损伤模型的构建结果 |
| 2.2 CoCl_2损伤对RGC-5细胞增殖和凋亡的影响 |
| 2.3 CoCl_2损伤对RGC-5细胞损自噬水平和自噬相关蛋白的影响 |
| 2.4 阿克苷处理对损伤的RGC-5细胞增殖、自噬和凋亡的影响 |
| 3.讨论与小结 |
| 第二部份阿克苷对CoCl_2损伤的RGC-5细胞miRNA表达的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 试剂与仪器 |
| 1.2 miRNA-seq检测RGC-5损伤与修复过程中异常表达的miRNA |
| 2 结果 |
| 2.1 芯片扫描结果 |
| 2.2 miRNAs在正常对照组、CoCl_2损伤组、阿克苷处理组RGC-5细胞中的表达差异情况 |
| 3.讨论与小结 |
| 第三部份阿克苷通过促进miR-342-3p对OPTN的负调控对损伤的RGC-5细胞的保护作用 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验试剂与仪器 |
| 1.2 实验分组及转染 |
| 1.3 OPTN重组质粒构建与敲降序列 |
| 1.4 CCK-8实验测定各组RGC-5细胞的增殖活力 |
| 1.5 qRT-PCR检测RGC-5细胞中miR-342-3p的表达 |
| 1.6 Western blotting检测RGC-5细胞中OPTN或细胞自噬相关蛋白的表达 |
| 1.7 免疫荧光实验检测OPTN或自噬相关蛋白的表达 |
| 1.8 双荧光素酶报告基因检测miR-342-3p与OPTN的靶向作用 |
| 1.9 透射电镜观察RGC-5细胞自噬小体的水平 |
| 1.10 流式细胞仪检测各组RGC-5细胞凋亡 |
| 1.11 实验数据处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 OPTN重组质粒构建结果 |
| 2.2 阿克苷对RGC-5细胞miR-342-3p和OPTN表达的影响 |
| 2.3 敲降miR-342-3p显着降低阿克苷对损伤RGC-5细胞的保护作用 |
| 2.4 miR-342-3p与OPTN的靶向作用关系 |
| 2.5 阿克苷通过miR-342-3p/OPTN分子轴调控RGC-5细胞增殖、自噬及凋亡 |
| 3.讨论与小结 |
| 第四部份 阿克苷通过OPTN和PI3K/AKT信号通路调控RGC-5细胞增殖、自噬和凋亡的作用机制 |
| 1.实验方法 |
| 1.1 试剂与仪器 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 细胞培养与转染 |
| 1.4 透射电镜观察自噬小体水平 |
| 1.5 Western blotting检测RGC-5细胞中OPTN或PI3K/AKT信号通路关键蛋白的表达 |
| 1.6 免疫荧光实验检测OPTN或PI3K/AKT信号通路及自噬相关蛋白的表达 |
| 1.7 检测Caspase3/7 |
| 1.8 实验结果的统计学处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 阿克苷通过OPTN抑制自噬 |
| 2.2 阿克苷通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制自噬 |
| 2.3 阿克苷与OPTN和PI3K/AKT/mTOR通路协同作用 |
| 2.4 阿克苷通过对自噬抑制的作用而降低RGC-5的凋亡水平 |
| 3.讨论与小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 视神经节细胞的凋亡及视神经保护的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（5）中药防治视网膜缺血再灌注损伤的研究进展（论文提纲范文）
| 1 自由基损害 |
| 2 细胞凋亡及基因调控 |
| 3 炎症反应的介入 |
| 4 对NO的调控 |
| 5 平衡Ca2+稳态 |
| 6 展望 |
（6）活血通络利水方对RIR大鼠视网膜神经纤维层厚度及AQP4，GLAST，GS表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 活血通络利水方对RIR大鼠视神经纤维层厚度的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物、药物、仪器耗材以及实验试剂 |
| 1.1.2 大鼠视网膜缺血—再灌注损伤模型的制作 |
| 1.1.3 动物分组及给药方法 |
| 1.1.4 检测方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 大鼠视网膜缺血再灌注损伤后神经纤维层厚度随着时间变化的趋势 |
| 1.2.2 活血通络利水方对造模后BN大鼠视神经纤维层厚度的影响 |
| 第2章 活血通络利水方对RIR大鼠AQP4、GLAST、GS的分子蛋白表达的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物、药物、仪器耗材以及实验试剂 |
| 2.1.2 大鼠视网膜缺血—再灌注损伤模型的制作与动物分组及实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 Westernblot检测造模后与造模服用通络利水方后AQP4、GLAST、GS的分子蛋白表达水平的变化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 造模与阳性对照药的选择 |
| 2.3.2 活血通络利水方对视网膜神经纤维层的影响 |
| 2.3.3 活血通络利水方对AQP4 的影响 |
| 2.3.4 缺血、缺氧时GLAST与 GS的生理功能及活血通络利水方对其的影响 |
| 2.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第3章 综述 视网膜缺血再灌注的分子机制与治疗 |
| 3.1 视网膜缺血再灌注损伤 |
| 3.1.1 视网膜缺血再灌注损伤的概念 |
| 3.1.2 视网膜缺血再灌注中谷氨酸浓度变化及兴奋毒性 |
| 3.1.3 Müller细胞与谷氨酸 |
| 3.1.4 水通道蛋白(AQP4)与谷氨酸的关系 |
| 3.1.5 视网膜水肿 |
| 3.1.6 视网膜缺血再灌注损伤时与神经纤维层厚度的关系 |
| 3.2 视网膜缺血再灌注损伤的中西医治疗 |
| 3.2.1 视网膜缺血再灌注损伤机制 |
| 3.2.2 西医的治疗 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
（7）天麻素调控小胶质细胞抗大鼠脑缺血再灌注损伤机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 天麻素预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 天麻素对缺血再灌注损伤后小胶质细胞中SOX4的调控 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 天麻素在神经系统疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（8）枸杞多糖对大鼠缺血再灌注视网膜保护作用的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 病理机制 |
| 1.3 枸杞多糖 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 材料及试剂 |
| 2.1.1 主要药品及试剂 |
| 2.1.2 主要实验仪器及设备 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 |
| 2.1.4 实验动物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验分组 |
| 2.2.2 建立SD大鼠视网膜缺血再灌注模型 |
| 2.2.3 视网膜缺血和血液供应恢复的测定 |
| 2.2.4 实验动物纳入和排除标准 |
| 2.2.5 实验取材 |
| 2.2.6 石蜡包埋 |
| 2.2.7 HE染色 |
| 2.2.8 免疫组化 |
| 2.2.9 观察方法 |
| 2.2.10 统计学方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 光镜下HE染色视网膜组织学观察 |
| 3.1.1 假手术组 |
| 3.1.2 模型组和药物组 |
| 3.1.3 模型组与药物组相比较 |
| 3.2 免疫组化 |
| 3.2.1 凋亡基因Caspase-3 蛋白表达的变化 |
| 3.2.2 凋亡基因Bcl-2 蛋白表达的变化 |
| 3.2.3 凋亡基因Bax蛋白表达的变化 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 视网膜缺血再灌注模型的建立 |
| 4.2 枸杞多糖的药理作用 |
| 4.3 视网膜缺血再灌注损伤机制 |
| 4.4 细胞凋亡及其相关蛋白基因与视网膜缺血再灌注损伤 |
| 4.5 枸杞多糖与视网膜疾病 |
| 第5章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（9）预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 自主跑轮预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 PI3K、STAT3信号通路介导了自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 脑部缺血预适应的诱发因素、机制及应用前景 |
| 参考文献 |
| 综述二 运动与学习和记忆能力关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（10）二甲双胍保护心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 二甲双胍保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用研究 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡的影响研究 |
| 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞自噬功能的作用研究 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 二甲双胍对急性心肌梗死患者行PCI术后损伤的保护作用 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 二甲双胍对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 抗高糖作用的机制 |
| 3 糖尿病心肌病 |
| 4 二甲双胍的多效性 |
| 5 缺血再灌注对心脏的影响 |
| 6 二甲双胍的心脏保护作用机制 |
| 7 总结 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
四、一氧化氮合酶在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及意义（论文参考文献）
- [1]牛黄及其有效成分对神经血管单元的保护作用研究[D]. 杜欣. 北京中医药大学, 2021(02)
- [2]芪灯明目胶囊对慢性高眼压大鼠模型眼压的影响及视神经保护的研究[D]. 米秋霖. 成都中医药大学, 2020(02)
- [3]西地那非对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用及机制研究[D]. 常威. 兰州大学, 2020(01)
- [4]阿克苷通过miR-342-3p/OPTN分子轴及下游PI3K/AKT信号通路调控RGC-5细胞自噬和凋亡的作用机制研究[D]. 陈前波. 昆明医科大学, 2019(02)
- [5]中药防治视网膜缺血再灌注损伤的研究进展[J]. 曹玲英,游志鹏,范慧敏. 实用临床医学, 2019(08)
- [6]活血通络利水方对RIR大鼠视网膜神经纤维层厚度及AQP4，GLAST，GS表达的影响[D]. 田根全. 华北理工大学, 2019(01)
- [7]天麻素调控小胶质细胞抗大鼠脑缺血再灌注损伤机制研究[D]. 李世鹏. 昆明医科大学, 2019
- [8]枸杞多糖对大鼠缺血再灌注视网膜保护作用的实验研究[D]. 曹玲英. 南昌大学, 2019(01)
- [9]预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究[D]. 叶宏. 昆明医科大学, 2019(05)
- [10]二甲双胍保护心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究[D]. 方晓玲. 苏州大学, 2019(04)