一、五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响（论文文献综述）
徐晚晴[1]（2021）在《益生乳杆菌对慢性牙周炎的缓解作用研究》文中认为慢性牙周炎是最为常见的一类牙周炎,约占牙周炎发病率的95%。慢性牙周炎可发生于任何年龄段,随着年龄增长,患病率和疾病的严重程度也不断增加。牙龈卟啉单胞菌是慢性牙周炎的主要致病菌,而具核梭杆菌则在致病过程中起到了协助牙龈卟啉单胞菌共聚黏附的“桥梁”作用。本研究从204株乳杆菌中筛选出对慢性牙周炎有缓解作用并具有口腔益生特性的乳杆菌,并对其作用机制进行初探。主要研究内容和结果如下:（1）利用混菌生物膜模型对204株乳杆菌进行筛选,以生物膜减少量为筛选指标进行初筛。而后利用牙周炎上皮细胞模型,以调节细胞炎症因子和调控紧密连接蛋白表达的能力进行复筛。筛选得到的植物乳杆菌CCFM1137和发酵乳杆菌CCFM1139对混菌生物膜的抑制率达40%以上,同时可以调节细胞表达炎症因子和紧密连接蛋白的水平。乳杆菌CCFM1137和CCFM1139对溶菌酶都表现出较高的耐受能力,并具有弱自成膜能力和较强的自聚共聚能力。因此筛选所得的植物乳杆菌CCFM1137和发酵乳杆菌CCFM1139不仅具有缓解牙周炎的作用,同时具有较好的口腔益生特性。（2）利用丝线结扎和牙周炎致病菌侵染结合的方式建立牙周炎大鼠模型,探究乳杆菌CCFM1137和CCFM1139在大鼠体内防治牙周炎的效果。经乳杆菌CCFM1137和CCFM1139防治后,能显着缓解大鼠因牙周炎引起的体重降低,减少牙周袋的形成,减轻牙龈红肿出血等症状。同时,乳杆菌CCFM1137和CCFM1139能够使牙周炎病原菌牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌在口腔中的定殖量降低1-2个数量级。此外,CCFM1137和CCFM1139对牙周炎过度的免疫反应也有一定调节作用,可以显着降低肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor,TNF）-α、白细胞介素（Interleukin,IL）-1β和IL-8的分泌。CCFM1137和CCFM1139还可以防止骨质流失,降低牙槽骨孔隙率,使牙槽骨吸收量由5435.56μm分别恢复至3765.33μm和3222.67μm。（3）对乳杆菌CCFM1137和CCFM1139可能存在的作用机制进行初探发现两株乳杆菌均能够在生物膜形成的不同阶段减少生物膜形成量和产胞外多糖产量,还可以减少生物膜中具核梭杆菌和牙龈卟啉单胞菌的活菌数。两株乳杆菌可以显着下调具核梭杆菌外孔膜蛋白相关基因（fomA）和菌体黏附相关基因（fadA）的表达,抑制具核梭杆菌的生长和与其他致病菌的凝集。同时,两株乳杆菌可以调节牙龈卟啉单胞菌毒力因子精氨酸牙龈素基因（Rgp Acd）和菌毛基因（FimA）的表达,减少其对宿主的损害。发酵乳杆菌CCFM1139还可下调牙龈卟啉单胞菌毒力因子血凝素基因（HA-2）的表达。综上,植物乳杆菌CCFM1137和发酵乳杆菌CCFM1139是具有防治牙周炎效果的口腔益生菌,在益生菌口腔护理产品的开发中具有广阔的应用前景。
张乾,包广洁[2]（2015）在《中药五倍子对牙周病防治的研究进展》文中研究指明五倍子又名百虫仓、百药煎、棓子,为同翅目蚜虫科的角倍蚜或倍蛋蚜雌虫寄生于漆树科植物"盐肤木"及其同属其他植物的嫩叶或叶柄,刺伤而生成一种囊状聚生物虫瘿,经烘倍干燥后所得[1]。五倍子中的主要有效成分为五倍子鞣质,称为鞣酸（tannic acid）,又叫单宁酸,有收敛、抗菌、解毒、止血等作用。用于肺虚久咳、肺热痰嗽、久泻久痢等症状[2,3]。牙周病是多种因素综合作用下引起的牙周组织破坏
张乾[3]（2014）在《三种藏药提取物对口腔致龋菌作用的初步研究》文中提出目的：选用具有清热解毒、抗菌抗病毒活性的三种藏药诃子、兔耳草、独一味制备的水提物和醇提物,对口腔常见致龋菌变形链球菌和乳酸杆菌生长、产酸的影响。初步比较和探讨这三种藏药的水提物和醇提物抗菌活性以及对变形链球菌和乳酸杆菌的生长和产酸的影响,为天然药物防治龋病提供新的思路。方法：1、分别制备三种藏药的水提物和醇提物,配成浓度为lmg/ml药液备用。2、用MS培养基和Rogasa培养基,分别对变形链球菌和乳酸杆菌进行固体培养和液体培养。3、将三种藏药两种方法的提取物分别用二倍稀释法稀释成浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml四个浓度梯度制备成药敏片用纸片法观察抑菌环直径大小。4、称量灭菌烘干后doff管的重量,按体积比12：1：1加入液体培养基、菌液、及各浓度藏药。同样按体积比12：1：1加入液体培养基、菌液、及加各浓度抗生素做阳性对照,37℃下厌氧培养18h后,1500r/min,10min离心,弃上清,沉淀称重,减去空离心管的重量得到湿菌重值,分析三种藏药两种提取方法各浓度药液对两种细菌生长的影响。5、将三种藏药两种方法提取物分别用二倍稀释法稀释成浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml、0.03125mg/ml五个浓度梯度制备含有各浓度实验药液和菌悬液的液体培养基,培养18h后,离心测上清液的pH值,分析三种藏药两种提取方法各浓度药液对两种细菌产酸的影响。结果：1、三种藏药水提物和醇提物对变形链球菌生长影响结合抑菌圈直径和湿菌重值得相似的结论即：水提诃子和水提兔耳草在最大浓度0.5mg/ml时对变形链球菌没都有抑菌作用,而水提独一味在浓度为0.0625mg/ml时对变形链球菌的生长都有抑制作用。醇提诃子的最大浓度0.5mg/ml对变形链球菌也没有抑菌作用。醇提兔耳草和醇提独一味在0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml时对变形链球菌生长有抑制作用。在0.0625mg/ml时对变形链球菌没有抑菌作用。2、三种藏药水提物和醇提物对变形链球菌产酸的影响水提诃子和水提兔耳草对变形链球菌的产酸没有抑制作用,反而有促进作用。随着药物浓度的降低PH值升高。水提独一味抑制变形链球菌的产酸。醇提诃子对变形链球菌的产酸没有影响。醇提兔耳草和醇提独一味都对变形链球菌的产酸有抑制作用。3、三种藏药水提物和醇提物对乳酸杆菌生长的影响水提诃子和水提兔耳草在浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml时对乳酸杆菌有抑菌作用。水提独一味的四个浓度梯度对乳酸杆菌都有抑菌作用。醇提诃子、醇提兔耳草、醇提独一味在分别在浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml时对乳酸杆菌有抑菌作用,在浓度0.0625mg/ml时都没有抑菌作用。4、三种藏药水提物和醇提物对乳酸杆菌产酸的影响水提诃子和醇提诃子、水提兔耳草和醇提兔耳草、水提独一味和醇提独一味对乳酸杆菌的产酸都有抑制作用。水提诃子和醇提诃子对抑制乳酸杆菌的产酸作用强于兔耳草和独一味提取物。结论：三种藏药的醇提物无论在对变形链球菌还是对乳酸杆菌的抑菌活性都比其水提物作用强。诃子提取物对变形链球菌的生长和产酸都没有抑制作用,但对乳酸杆菌的生长和产酸抑制作用都强于兔耳草和独一味。独一味的提取物对变形链球菌和乳酸杆菌的生长和产酸都有抑菌作用。兔耳草两种提取物对变形链球菌和乳酸杆菌的抑菌活性和抑制产酸的能力介于诃子和独一味两者之问。
盛芳[4]（2012）在《五黄提取物拮抗内毒素对人牙周膜成纤维细胞毒性作用的实验研究》文中进行了进一步梳理根管治疗术（root canal therapy, RCT）是目前牙髓病和根尖周病最有效和最完善的治疗方法。作为根管治疗的重要环节,根管冲洗可去除和控制感染根管内细菌及其代谢产物。五倍子具有抗菌、收敛等功效；黄芩主要有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。本课题拟研制上述两种中药的水提取物复合制剂作为一种新型的根管冲洗剂,并通过体外实验,检测其拮抗LPS（内毒素脂多糖）对人牙周膜成纤维细胞的毒性作用,从而为新型中药根管冲洗剂的研制提供理论基础和实验依据。目的：研究不同浓度五黄提取物抑制LPS对牙周膜成纤维细胞的毒性作用,为该新型中药根管冲洗剂的临床应用提供依据。方法：本实验采用的细胞是用组织块原代培养而获得的人牙周膜成纤维细胞。实验分为：实验一：通过MTT法检测不同浓度五黄提取物拮抗LPS对牙周膜成纤维细胞的增殖的影响。取生长状态良好的第5代人牙周膜成纤维细胞接种于96孔板,并随机分为三组,即空白对照组、药物组、LPS组。空白对照组加入DMEM培养液；药物组分别加入各浓度的五黄提取物和LPS,即12.5μg/ml十100μg/ml LPS、25μg／ml十100μg/ml LPS、50μg/ml+100gg/ml LPS；LPS组加入100μg/ml LPS+DMEM培养液。24、48、72小时后,采用MTT法测定各组别每孔吸光度值。实验二：五黄提取物对LPS刺激牙周膜成纤维细胞分泌的炎症因子TNF-α的影响。取生长状态良好的第5代人牙周膜成纤维细胞接种于24孔板,并随机分为空白对照组、药物组、LPS组。空白对照组加入DMEM培养液；药物组分别加入各浓度的五黄提取物和LPS,即12.5μg/ml＋100μg/mlLPS、25μg/ml十100μg/ml LPS和50μg/ml+100μg/ml LPS;LPS组加入100μg/ml LPS+DMEM培养液。于第12、24和48小时吸取上清液,4℃离心、分装,并放入-20℃低温冰箱冻存待检。采用ELISA试剂盒检测上清液中TNF-a的水平。结果：1.100μg∥ml LPS在24h、48h、72h与空白组相比能够明显抑制牙周膜成纤维细胞的增殖活性（p<0.05）；在LPS存在的条件下,加入不同浓度的五黄提取物于牙周膜成纤维细胞中,随着时间的延长,与LPS组相比较,不同浓度的五黄提取物在24h、48h均能使牙周膜成纤维细胞的增殖活力明显提高,在72h时仅25μg/m能使牙周膜成纤维细胞的增殖活力明显提高,其中25μg/ml在24h时的效果最明显。2.与空白组相比,LPS能明显升高牙周膜成纤维细胞分泌TNF-a的水平（p<0.05）。在LPS存在的条件下,12.5μg/ml、25gg/ml以及50μg/ml的五黄提取物组均能使人牙周膜成纤维细胞促炎因子TNF-α的分泌明显降低（p<0.05）,其中25μg/ml的五黄提取物在24h时的作用效果最明显。结论：五黄提取物能有效拮抗内毒素对人牙周膜成纤维细胞毒性作用,对牙周膜成纤维细胞具有保护作用。
张爽[5]（2010）在《五倍子缓释凝胶促进牙周组织再生的实验研究》文中研究指明牙周病是由多种因素综合作用下引起的牙周组织破坏性感染性疾病,牙菌斑生物膜的细菌及其产物是引发牙周病的始动因子,但细菌的破坏是有限的,由细菌引发一系列免疫、炎症反应才是造成牙周组织破坏的主要原因。因此对其治疗往往受全身、局部以及环境等各种因素的干扰而影响最终效果。目前对牙周病的治疗尚无理想的方法,虽然抗菌药物等能有效控制炎症的发展,但却存在病变局部药物浓度低,用药量大,长期使用易产生耐药性等缺点,因此,局部用药特别是局部缓控释剂的应用受到广泛关注。其中局部缓释剂由于具有持续稳定的有效药物浓度,发挥较长时间的治疗作用,减少用药频率,毒副作用小,患者的依从性好等优点,已成为牙周病治疗的主要用药方式。但目前临床使用的牙周缓释剂还存在诸多不足（如药物释放时间短、释药不完全等）,尚无一种可达到理想标准,难以满足临床要求。天然药物是近年来研究的热点,中药五倍子具有解毒、止血、固肾、生津等多种功效,其主要有效成分五倍子鞣质,对常见的牙周可疑致病菌有广谱的抗菌作用,可抑制内毒素诱导细胞炎性因子的释放,并能显着降低胶原酶的活性,对牙周组织有明显的保护作用。本实验在祝磊研制的五倍子缓释凝胶的基础上,通过体外实验考察该制剂的细胞毒性、抑菌效果,并通过动物实验观察其对实验性牙周炎的治疗效果,为其开发应用提供参考。1、五倍子缓释凝胶体外细胞毒性的研究。参照祝磊研制的五倍子缓释凝胶,用磁力搅拌机搅拌1、3、5d后,分别制成挥发1d的五倍子缓释凝胶、挥发3d的五倍子缓释凝胶、挥发5d的五倍子缓释凝胶。使用上述三种五倍子缓释凝胶及对照组（派力奥软膏,阴性对照组只加培养液,阳性对照组加终末浓度为0.5g/ml苯酚）对L-929细胞进行处理。运用MTT法分别检测不同挥发时间的五倍子缓释凝胶释放液对L-929细胞的增殖情况。结果显示:挥发5d的五倍子缓释凝胶培养17d的细胞密度和形态均与派力奥软膏组和阴性对照组相似,呈长梭形和多角形,细胞突细长,伸展性良好,呈放射状排列,胞体丰满,胞质均匀,核圆形或卵圆形。细胞毒性均为1级,符合临床治疗的要求。2、五倍子缓释凝胶的体外抑菌实验。本实验体外培养细菌,采用纸片法检测五倍子缓释凝胶对Pg、Fn、Pi三种常见可疑致病菌的抑菌效果。结果显示:五倍子缓释凝胶对Pg、Fn、Pi均有一定抑制作用,其中对Pg和Fn的抑菌效果明显优于派力奥软膏。但对Pi的抑菌效果不明显,具体机理还需进一步研究。3、五倍子缓释凝胶对Beagle犬实验性牙周炎治疗效果的观察。选择2岁健康Beagle犬7只,每只犬选择上颌第二、三前磨牙和第一磨牙;下颌第三前磨牙和第一、二磨牙,用3.0手术丝线进行结扎建模,经30d后,根据临床各标准、X线片,及随机抽取1只建模犬与正常对照犬一并处死,取材进行组织学观察,确定已达到实验性牙周炎模型后,分别用五倍子缓释凝胶（实验组）、派力奥软膏（阳性对照）进行治疗,并以非药物载体作空白对照。每周使用药物1次,连续4周,分别于用药1w、2w、3w、4w后检查GI、BOP、PD等临床指标,并于治疗结束后拍X线片观察各组的治疗效果。结果显示:建模30d后实验牙均达到牙周炎标准。经4w治疗后,与基线相比,除空白载体组外,五倍子缓释凝胶实验组和派力奥软膏组的PD、BOP、GI均有明显好转,有显着性差异（P<0.05）。其中PD下降幅度以五倍子缓释凝胶组较好,与派力奥软膏组相比有显着性差异（P<0.05）;X线片显示五倍子缓释凝胶组的CEJ-B距离明显缩短,而派力奥软膏组和空白载体组相比无显着性差异（P<0.05）。4、五倍子缓释凝胶对Beagle犬实验性牙周炎治疗效果的组织学观察。实验分组与治疗方法同实验三,治疗4周后,处死动物,完整切取包括牙齿、牙周组织和颌骨样本, H.E染色,镜下观察。测量新结合上皮至釉牙骨质界的距离（JE-CEJ）和新生结缔组织（NCT）。用Meason三色染色法观察新生牙槽骨形成情况,测量新生牙槽骨高度（N-B）,用BI2000图像分析软件,以mm为单位,精确度0.001mm。结果显示:各组NCT和JE-CEJ距离均以五倍子缓释凝胶组最小,与其他两组相比,有显着性差异（P<0.05）;新生牙槽骨高度（N-B）也以五倍子缓释凝胶组最高,与其他两组相比有显着性差异（P<0.05）,而派力奥软膏组在JE-CEJ、NCT、N-B三项指标均与空白对照组相比无显着性差异（P>0.05）
兰雪松,唐荣银[6]（2009）在《五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响》文中认为目的:观察不同浓度五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法:采用组织块法体外培养人牙髓细胞,以含不同浓度五倍子水提取物2.5、5、10、20、40、100μg/mL内毒素和20 mL/L胎牛血清的DMEM共同培养第5代人牙髓细胞,对照组用只含100μg/mL LPS、200 mL/L胎牛血清的DMEM培养。分别于培养后1、2、3、4、5 d,用酶联免疫检测仪检测细胞碱性磷酸酶活性,采用单因素方差分析（完全随机设计）、t检验对实验数据进行统计学分析。结果:2.5、5、10μg/mL五倍子水提取物均能明显拮抗100μg/mL内毒素对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的抑制作用,其中以5μg/mL五倍子水提取物拮抗作用最好,且随时间延长,拮抗作用越明显。20μg/mL和40μg/mL五倍子水提取物拮抗LPS的作用不明显。结论:低浓度的五倍子水提取物具有拮抗内毒素对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的抑制作用,并呈时间依赖性。
祝磊[7]（2009）在《五倍子牙周缓释凝胶的研制及体外实验的研究》文中指出牙周病是多因素疾病,到目前为止,尚无理想的治疗方法。牙菌斑生物膜及其产物是牙周病的始动因子,但细菌的破坏是有限的,由细菌引发的局部及全身的一系列宿主免疫反应才是造成牙周组织破坏的主要原因。而牙周疾病所造成的牙周附着丧失一直是临床治疗中面临的一个非常棘手的难题。药物治疗作为牙周治疗中一种不可或缺的手段,常常用于机械刮治术后以提高和巩固疗效。其中局部缓释剂能直接作用于病变组织,长时间保持局部有效药物浓度等诸多优点而成为牙周病治疗的主要用药方式,但目前临床使用的牙周缓释剂还存在诸多不足,尚无一种可达到理想标准,难以满足临床要求。天然药物是近年来研究的热点,其中五倍子具有抗菌,止血,收敛等多种功效。已有研究表明,五倍子对牙周可疑致病菌有抑制作用;能拮抗LPS对牙周膜细胞的损伤,并促进其增殖和在牙骨质片上的附着;能通过抑制胶原酶的活性阻止胶原的降解。聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）是可生物降解的高分子缓释载体,随着材料在体内的逐渐降解,复合在载体材料中的药物则缓慢释放,达到持续作用的目的。本研究拟将五倍子水提取物与PLGA相结合,研制一种理化性质符合临床需要的缓释凝胶制剂,并通过体外培养HPDLFs,考察该制剂对细胞增殖,ALP活性及MMP-3表达的影响,初步探讨其用于牙周病治疗的可行性。本研究分四个实验:实验一五倍子牙周缓释凝胶配比的初步测定和药物释放度检测将不同浓度的PLGA和不同的溶剂配比制成五倍子缓释凝胶,观察其溶解、凝结时间及理化性状,并进行体外释放度测定,考察各因素对凝胶中药物体外释放的影响。结果显示:混合溶剂中1MP的含量越多,PLGA溶解的越快,GTA的含量越多,制备出的凝胶流动性越小,凝胶遇水凝结时间就越长;而在相同比例的混合溶剂中,PLGA浓度越高,制成的凝胶越黏稠,遇水凝结时间也越短。凝胶体外释放度测定结果表明药物的释放速度与混合溶剂中1MP比例成正比,与GTA的比例及PLGA的浓度成反比,同时药物浓度越高,初释率也越高;所有制剂7d的累计释放率都超过了80%。综合各项因素,我们初步确定1MP∶GTA = 7∶3,PLGA浓度为40%,五倍子浓度为8%为缓释凝胶配比的参考值。实验二五倍子牙周缓释凝胶的配方筛选及质量考察本实验将PLGA浓度、溶剂配比和五倍子浓度按三因素三水平作正交设计,进行体外释放度试验,以第6d的释放百分率为指标,计算极差,以探寻五倍子牙周缓释凝胶的最优配方,同时进行凝胶的质量考察。结果显示:按极差大小来判断,三个因素对凝胶影响大小的顺序为PLGA浓度>溶剂配比>五倍子浓度,最佳配方为PLGA浓度35%,1MP∶GTA = 7∶3,五倍子浓度为4%。经过质量考察说明该凝胶质地均匀,细腻,有一定粘稠度且稳定性好。实验三五倍子牙周缓释凝胶对LPS抑制HPDLFs增殖及ALP活性的影响采用细胞培养技术,MTT法,酶联免疫技术观察五倍子牙周缓释凝胶对LPS抑制HPDLFs增殖及ALP活性的影响。结果显示:100μg/mL LPS可显着抑制HPDLFs的增殖和ALP活性。而加入五倍子凝胶释放液后,与LPS组相比,各时间点凝胶释放液组的细胞增殖活性和ALP活性均有所提高,其中第3d释放液组的效果最明显。此结果说明五倍子牙周缓释凝胶可有效拮抗LPS对细胞的抑制作用。实验四五倍子牙周缓释凝胶对LPS介导HPDLFs分泌MMP-3的影响本实验体外培养细胞,运用ELISA分别检测单纯LPS作用组和LPS加不同时间点凝胶释放液组下HPDLFs分泌MMP-3的量。结果显示:与空白对照组相比,50μg/m L的LPS即能明显促进HPDLFs分泌MMP-3（P<0.05）,100μg/m L的LPS促进作用更显着;加入五倍子凝胶释放液后,各时间点凝胶释放液组MMP-3的量均明显低于LPS组（P<0.05）,而且,各时间点凝胶释放液组之间亦有显着性差异（P<0.05）,其中,2h释放液组MMP-3最低,相对于LPS组,对MMP-3的抑制率为75.77%,随着释放时间的延长,抑制作用逐渐减弱,但第7d释放液仍有32.26%的抑制率。提示:五倍子牙周缓释凝胶可有效抑制LPS介导HPDLFs分泌MMP-3,抑制作用可持续7d。
兰雪松,唐荣银,罗君欢[8]（2007）在《五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响》文中进行了进一步梳理目的:观察不同浓度及不同作用时间的五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响。方法:采用组织块法体外培养牙髓细胞,以不同浓度五倍子水提取物（1.25×103、2.5×103、5×103、10×103、20×103μg/L）和1×105μg/L内毒素作用于人牙髓细胞,用四唑盐比色试验（MTT法）检测细胞活性,采用单因素方差分析（完全随机设计）对实验数据进行统计学分析。结果:低浓度（1.25×103、2.5×103、5×103μg/L）五倍子水提取物能明显拮抗100μg/mL内毒素对细胞活性的抑制作用（P<0.01）,2.5×103μg/L五倍子水提取物拮抗1×105μg/L内毒素对细胞活性的抑制作用第3天开始明显增加,并呈时间依赖性。结论:低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对人牙髓细胞活性的抑制作用。
兰雪松[9]（2007）在《五倍子水提取物拮抗内毒素对人牙髓细胞毒性作用的实验研究》文中研究指明牙髓炎是以G-厌氧菌感染为主的感染性疾病,是口腔科常见疾病之一。G-菌细胞壁外膜中的脂多糖是主要的毒力因子,LPS可引起牙髓组织明显的炎症反应,且对牙髓组织细胞有明显的毒性作用。HDPCs是牙髓组织中的主体细胞,HDPCs不仅具有合成牙髓有机质的能力,而且必要时还能分化为成牙本质细胞保护牙髓。LPS可以通过2条途径作用于HDPCs,直接作用:主要表现为抑制HDPCs增殖和分化,损伤HDPCs超微结构,刺激HDPCs产生细胞因子;间接作用:LPS刺激免疫细胞产生细胞因子,再作用于HDPCs。因此,采取有效措施拮抗LPS对HDPCs的毒性作用意义重大。中药五倍子具有抗菌、抗病毒、抗氧化和收敛等作用,能降解LPS,阻断其生物学效应。本研究通过细胞培养技术、MTT实验、放射免疫检测法及透射电镜观察等方法观察五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖和HDPCs的ALP活性,LPS损伤HDPCs超微结构,LPS诱导HDPCs分泌IL-6的影响,探讨五倍子水提取物拮抗LPS对HDPCs的毒性作用。实验一五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖的影响本实验采用MTT法检测五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs增殖的影响。结果显示,培养液中加入浓度为50μg/ml、100μg/ml的LPS时,HDPCs的增殖活性受到明显抑制,加入低浓度（1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml）五倍子水提取物能明显拮抗100μg/ml的LPS对HDPCs增殖的抑制作用,2.5μg/ml五倍子水提取物拮抗100μg/ml的LPS对HDPCs增殖抑制作用第3天开始明显增加,并呈时间依赖性。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够拮抗LPS对HDPCs增殖的抑制作用。实验二五倍子水提取物对LPS损伤HDPCs超微结构影响本实验采用透射电镜观察五倍子水提取物对LPS损伤HDPC超微结构的影响。结果显示100μg/ml内毒素对牙髓细胞超微结构有不同程度的损伤,加入5μg/ml五倍子水提取物后,牙髓细胞超微结构损伤明显减轻,细胞器结构基本恢复正常。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够抑制内毒素对HDPCs超微结构的损伤作用。实验三五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs的ALP活性影响本实验采用酶动力学法检测五倍子水提取物对LPS抑制HDPCs的ALP活性的影响。结果显示,低浓度（2.5、5、10μg/ml）五倍子水提取物能明显拮抗100μg/ml内毒素对细胞ALP活性的抑制作用,5μg/ml五倍子水提取物拮抗100μg/ml内毒素对细胞ALP活性的抑制作用第2天开始明显增加,并呈时间依赖性。由此说明,低浓度五倍子水提取物能够拮抗内毒素对HDPCs的ALP活性的抑制作用。实验四五倍子水提取物对LPS诱导HDPCs产生IL-6影响本实验采用放免法检测五倍子水提取物对LPS诱导HDPCs产生IL-6的影响。结果显示2.5、5、10、20μg/ml五倍子水提取物能明显抑制25μg/ml的LPS诱导HDPCs分泌IL-6,并呈浓度依赖性。由此说明,一定浓度范围内五倍子水提取物能够抑制LPS诱导HDPCs分泌IL-6。
卢婧[10]（2007）在《五倍子水提取物对体外培养人牙髓细胞生物学特性影响的实验研究》文中提出牙髓疾病多继发于龋病,是一个以细菌、细菌代谢产物及炎性因子等多因素参与的复杂过程。如何保护牙髓组织,促进牙髓细胞增殖、分化,发挥防御修复潜能是活髓保存治疗中研究的重点。五倍子中的主要有效成分为鞣酸,具有抗菌、抗自由基、收敛、止血、止痛、减少渗出等多种功效。已有研究证实它能抑制胶原分解,促进牙本质再矿化,抑制釉质脱矿,用鞣酸间接盖髓能促进修复性牙本质的形成。但是尚未有文献报道其对直接盖髓治疗的作用。本实验旨在观察五倍子水提取物对体外培养人牙髓细胞基本生物学特性的影响,初步探讨其作为直接盖髓材料的可能性。第一部分人牙髓细胞原代培养方法的比较本实验分别采用组织块法、酶消化法及组织块酶消化法进行人牙髓细胞原代培养。结果显示:组织块酶消化法中组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于单纯组织块法和单纯酶消化法,成功率较高。提示:采用组织块酶消化法可提高人牙髓细胞原代培养的成功率。第二部分五倍子水提取物对人牙髓细胞增殖活性及细胞周期的影响实验一五倍子水提取物对人牙髓细胞增殖活性的影响本实验采用MTT比色分析法,观察2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞增殖活性的影响。结果显示:五倍子水提取物浓度<20μg/ml时对人牙髓细胞的生长有促进作用,并且该促进作用具有时间依赖性,其中以10μg/ml浓度作用最为明显,而40μg/ml浓度可抑制细胞活性,抑制效应见于72h后,并随时间的延长抑制作用加强。实验二五倍子水提取物对人牙髓细胞周期的影响本实验采用流式细胞仪检测技术,观察不同浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞周期的影响。结果显示:五倍子水提取物作用后,DNA合成前期（G1期）细胞比例明显下降,而DNA合成期（S期）细胞比例及细胞增殖指数上升,其中以10μg/ml的五倍子水提取物作用最为明显。第三部分五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶及矿化的影响实验一五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响本实验通过检测2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml浓度的五倍子水提取物作用于人牙髓细胞后对其碱性磷酸酶活性的影响。结果显示:2.5μg/ml、5μg/ml浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶的活性无影响,而浓度≥10μg/ml时可抑制其活性,其中以40μg/ml浓度作用最为明显。实验二五倍子水提取物对体外连续培养人牙髓细胞矿化能力的的影响本实验采用钙质染色方法,镜下观察2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml浓度的五倍子水提取物连续作用于体外培养的人牙髓细胞,对其矿化能力的影响。结果显示:五倍子水提取物可以促进体外连续培养人牙髓细胞的矿化能力。第四部分五倍子水提取物对人牙髓细胞I型胶原合成的影响本实验采用免疫组织化学方法,观察了5μg/ml、10μg/ml浓度的五倍子水提取物对人牙髓细胞I型胶原合成的影响。结果显示:正常人牙髓细胞中可见I型胶原的表达,加入五倍子水提取物后,能明显促进人牙髓细胞I型胶原的合成。
二、五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响（论文提纲范文）
（1）益生乳杆菌对慢性牙周炎的缓解作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 牙周炎 |
| 1.1.1 牙周炎的危害 |
| 1.1.2 牙周炎的分类 |
| 1.1.3 牙周炎发病机制 |
| 1.2 牙周炎的防治方法 |
| 1.2.1 牙周洁治术 |
| 1.2.2 抗生素法 |
| 1.2.3 植化物法 |
| 1.2.4 益生菌法 |
| 1.3 益生菌防治牙周炎研究进展 |
| 1.3.1 国内外研究进展 |
| 1.3.2 益生菌作用机制 |
| 1.4 益生菌口腔应用前景与局限性 |
| 1.4.1 应用前景 |
| 1.4.2 局限性 |
| 1.5 立题依据及主要研究内容 |
| 1.5.1 立题依据 |
| 1.5.2 主要研究内容 |
| 第二章 具有缓解慢性牙周炎作用的乳杆菌筛选及益生特性评价 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与设备 |
| 2.2.1 实验菌株及细胞 |
| 2.2.2 实验材料与试剂 |
| 2.2.3 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 菌悬液与上清液的制备 |
| 2.3.2 细胞培养 |
| 2.3.3 生物膜量测定 |
| 2.3.4 细胞炎症因子测定 |
| 2.3.5 细胞紧密连接蛋白相对表达量测定 |
| 2.3.6 溶菌酶耐受能力评价 |
| 2.3.7 自成膜能力评价 |
| 2.3.8 自聚共聚能力评价 |
| 2.3.9 数据处理 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 基于抑制生物膜形成量的乳杆菌筛选 |
| 2.4.2 基于调控炎症因子分泌的乳杆菌筛选 |
| 2.4.3 基于调节紧密连接蛋白表达的乳杆菌筛选 |
| 2.4.4 溶菌酶耐受能力评价 |
| 2.4.5 自成膜能力 |
| 2.4.6 自聚共聚能力 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 乳杆菌CCFM1137与CCFM1139 对大鼠慢性牙周炎的缓解作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与设备 |
| 3.2.1 实验动物与饲料 |
| 3.2.2 实验材料与试剂 |
| 3.2.3 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 动物实验设计 |
| 3.3.2 体重 |
| 3.3.3 牙龈指数和探诊深度评分 |
| 3.3.4 牙周致病菌与乳杆菌计数 |
| 3.3.5 口腔菌群测定 |
| 3.3.6 牙龈组织炎症因子测定 |
| 3.3.7 牙槽骨微结构测量 |
| 3.3.8 牙周组织病理分析 |
| 3.3.9 数据分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 大鼠体重分析 |
| 3.4.2 大鼠牙龈指数和探诊深度 |
| 3.4.3 口腔微生物定殖变化分析 |
| 3.4.4 大鼠口腔菌群分析 |
| 3.4.5 牙龈组织细胞因子变化分析 |
| 3.4.6 牙槽骨微结构变化分析 |
| 3.4.7 牙周组织病理损伤分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 乳杆菌CCFM1137和CCFM1139 作用机制初探 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与设备 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 生物膜量测定 |
| 4.3.2 产胞外多糖量测定 |
| 4.3.3 生物膜中活菌计数 |
| 4.3.4 致病菌基因相对表达量测定 |
| 4.3.5 数据分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 不同干预时间对生物膜形成量的影响 |
| 4.4.2 不同干预时间对胞外多糖产量的影响 |
| 4.4.3 生物膜中活菌数的变化分析 |
| 4.4.4 致病菌基因表达变化分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 主要结论与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 Ⅰ:作者在攻读硕士学位期间发表的论文与成果 |
| 附录 Ⅱ |
（2）中药五倍子对牙周病防治的研究进展（论文提纲范文）
| 1 五倍子抗菌及抗内毒素作用 |
| 2 五倍子抑制炎症反应作用 |
| 3 五倍子促进牙周组织再生修复 |
| 4 展望 |
（3）三种藏药提取物对口腔致龋菌作用的初步研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 三种藏药提取物对变形链球菌生长和产酸的影响 |
| 实验一 三种藏药提取物对变形链球菌生长的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 实验结论 |
| 实验二 三种藏药提取物对变形链球菌产酸的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 实验结论 |
| 第二部分 三种藏药提取物对乳酸杆菌生长和产酸的影响 |
| 实验一 三种藏药提取物对乳酸杆菌生长的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 实验结论 |
| 实验二 三种藏药提取物对乳酸杆菌产酸的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 实验结论 |
| 全文讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（4）五黄提取物拮抗内毒素对人牙周膜成纤维细胞毒性作用的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号及缩略语表 |
| 前言 |
| 实验一 不同浓度五黄提取物拮抗LPS抑制牙周膜成纤维细胞增殖的研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 实验二 五黄提取物对LPS刺激牙周膜成纤维细胞分泌的炎症因子TNF-α的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（5）五倍子缓释凝胶促进牙周组织再生的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 实验一 五倍子缓释凝胶的体外细胞毒性实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 五倍子缓释凝胶的体外抑菌实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 五倍子缓释凝胶对BEAGLE犬实验性牙周炎疗效的观察 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验四 五倍子缓释凝胶对实验性牙周炎治疗效果的组织学观察 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 临床病例 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要仪器和试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 五倍子水提取物的制备 |
| 1.2.2 人牙髓细胞培养 |
| 1.2.3 LPS对人牙髓细胞ALP活性的影响 |
| 1.2.4不同浓度五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞ALP活性的影响 |
| 1.2.5 五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞ALP活性影响的时间效应 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同浓度LPS对人牙髓细胞ALP活性的影响 |
| 2.2 不同浓度五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞ALP活性的影响 |
| 2.3 5μg/mL五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞ALP活性影响的时间效应 |
| 3 讨论 |
（7）五倍子牙周缓释凝胶的研制及体外实验的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 实验一 五倍子牙周缓释凝胶配比的初步筛选和药物释放度检测 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 五倍子牙周缓释凝胶的配方筛选及质量考察 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 五倍子牙周缓释凝胶对LPS抑制HPDLFs增殖及ALP活性的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验四 五倍子牙周缓释凝胶对LPS 介导HPDLFs 分泌MMP-3 的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 临床病例 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（8）五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和仪器 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 人牙髓细胞的形态学观察及鉴定 |
| 2.2 LPS分别对人牙髓细胞活性的影响 |
| 2.3 五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞活性的浓度效应 |
| 2.4 五倍子水提取物对LPS抑制人牙髓细胞活性的时间效应 |
| 3 讨论 |
（9）五倍子水提取物拮抗内毒素对人牙髓细胞毒性作用的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言和文献回顾 |
| 1. HDPCs 的分布、形态及生物学特征 |
| 2. LPS 的化学组成和主要生物学活性 |
| 3. LPS 对 HDPCs 的作用 |
| 4. LPS 对宿主细胞产生作用的机理 |
| 5. 拮抗LPS 对HDPCs 作用药物研究 |
| 6. 中药抗LPS 损伤的特点与机制 |
| 7. 中药五倍子的研究概况 |
| 正文 |
| 实验一 五倍子水提取物对LPS 抑制HDPCs 增殖的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 5. 附图 |
| 实验二 五倍子水提取物对 LPS 损伤HDPCs 超微结构影响 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 5. 附图 |
| 实验三 五倍子水提取物对LPS 抑制 HDPCs 的 ALP 活性影响 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 实验四 五倍子水提取物对LPS 诱导 HDPCs 产生 IL-6 影响 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（10）五倍子水提取物对体外培养人牙髓细胞生物学特性影响的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言和文献回顾 |
| 正文 |
| 第一部分 人牙髓细胞原代培养方法的比较研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 五倍子水提取物对人牙髓细胞增殖活性及细胞周期的影响 |
| 实验一 五倍子水提取物对人牙髓细胞增殖活性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 实验二 五倍子水提取物对人牙髓细胞周期的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 五倍子水提取物对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化的影响 |
| 实验一 五倍子水提取物对人牙髓细胞ALP活性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 实验二 五倍子水提取物对人牙髓细胞矿化的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第四部分 五倍子水提取物对人牙髓细胞I型胶原合成的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 个人简历以及硕士在读期间发表的论文 |
| 致谢 |
四、五倍子水提取物对LPS抑制人牙龈成纤维细胞DNA合成和对细胞周期改变的影响（论文参考文献）
- [1]益生乳杆菌对慢性牙周炎的缓解作用研究[D]. 徐晚晴. 江南大学, 2021(01)
- [2]中药五倍子对牙周病防治的研究进展[J]. 张乾,包广洁. 口腔医学研究, 2015(01)
- [3]三种藏药提取物对口腔致龋菌作用的初步研究[D]. 张乾. 兰州大学, 2014(11)
- [4]五黄提取物拮抗内毒素对人牙周膜成纤维细胞毒性作用的实验研究[D]. 盛芳. 山东大学, 2012(02)
- [5]五倍子缓释凝胶促进牙周组织再生的实验研究[D]. 张爽. 第四军医大学, 2010(03)
- [6]五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响[J]. 兰雪松,唐荣银. 牙体牙髓牙周病学杂志, 2009(12)
- [7]五倍子牙周缓释凝胶的研制及体外实验的研究[D]. 祝磊. 第四军医大学, 2009(12)
- [8]五倍子水提取物对内毒素抑制人牙髓细胞活性的影响[J]. 兰雪松,唐荣银,罗君欢. 口腔医学研究, 2007(04)
- [9]五倍子水提取物拮抗内毒素对人牙髓细胞毒性作用的实验研究[D]. 兰雪松. 第四军医大学, 2007(03)
- [10]五倍子水提取物对体外培养人牙髓细胞生物学特性影响的实验研究[D]. 卢婧. 第四军医大学, 2007(03)