肉犬免疫失败致犬瘟热流行调查

肉犬免疫失败致犬瘟热流行调查

一、肉用犬免疫失败发生犬瘟热疫情的调查(论文文献综述)

程建国,叶俊奇[1](2021)在《警犬主要传染病流行情况及防控措施》文中研究说明当前我国公安部门针对警犬传染疾病防治工作原则是"预防为主、养防结合、防重于治",较为系统和全面揭示了养、防、治等各个环节之间存在的联系。其中疾病预防位于首位,同时要融入警犬饲养全过程。我国警犬饲养、管理方式以集约化为主,表现出较强的人力依赖性、外部隔离困难、饲养密度较高等特点。由于警犬工作环境和内容复杂多变,犬舍卫生得不到有效保障,

李文佳[2](2021)在《犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用》文中研究表明犬瘟热是一种犬类的高度接触性传染性疾病,由于病程晚期病毒对患犬神经元损伤极大,患犬神经症状方面的后遗症难以治愈不可逆转,一旦幼犬感染死亡率可以达到80%。早期诊断、早期治疗是防控犬瘟热病毒感染与蔓延的最好办法。因此,迫切需要建立一种快捷、敏感、特异和准确的一步法RT-PCR检测方法用于犬瘟热病毒感染的早期诊断,以减少犬瘟热病毒感染与蔓延。本试验根据Gen Bank中登录的犬瘟热病毒基因序列(JN381190),使用oligo软件在编码犬瘟热病毒核蛋白的N基因保守区内设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增CDV的部分N基因,经TA克隆、转化、摇菌、酶切与测序鉴定,确定所设计引物的特异性后,经一步法RT-PCR检测方法的反应条件优化,特异性试验、敏感性试验和重复性试验,建立用于CDV诊断的一步法RT-PCR检测方法,并将其应用于临床实践。结果表明,最优退火温度为52.3℃,最优引物浓度为0.5 pmol/μL,一步法RT-PCR检测方法的最终反应体系为:2×one-step buffer 12.5μL,one-step Enzyme Mix 1μL,RNA模板4μL,CDV-F与CDV-R引物各1μL,加水补齐至25μL;最优反应程序为:52.3℃30 min;94℃2 min;94℃30 s、52℃30s、72℃20 s,35个循环:72℃延伸10 min。特异性试验显示仅能扩增到CDV的N基因,而对狂犬病病毒(RABV)、犬细小病毒(CPV)和鹅细小病毒(GPV)的基因组均无扩增;敏感性和重复性试验显示,该方法的敏感性可达到0.1 ng,重复性试验批间与批内变异系数小于2%。应用已建立的一步法RT-PCR检测方法,以及普通两步RT-PCR检测方法和免疫胶体金试纸卡,同时对采自延边地区多家动物医院36份疑似犬瘟热病毒感染的肛门拭子进行检测。其中,一步法RT-PCR检测方法和普通两步RT-PCR检测方法均检出4份阳性样本,阳性率为11.11%,而胶体金试纸卡仅检测出2份阳性。因此,本试验成功建立了犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法,该方法敏感性高,特异性和重复性好,可用于犬瘟热病毒感染的早期诊断与监测。

温慧明[3](2020)在《大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查》文中研究指明本文收集2013年6月~2018年6月五年间大连市城区内(包括中山区、西岗区、沙河口区和甘井子区)犬瘟热病和犬细小病毒病这两类犬传染病的病例资料和诊断报告,对大连市城区内犬瘟热病和犬的细小病毒病这两类犬传染病流行情况进行监测调查分析,运用流行病学及防治调查分析的方法,统计大连市城区内犬瘟热和犬细小病毒病两类犬传染病的流行特征和流行趋势以及治疗方法,为犬传染病的预防控制措施提供科学的理论依据,为动物诊疗机构(包括动物诊所和动物医院)提供治疗犬瘟热病和犬的细小病毒病指导和借鉴。2013年6月~2018年6月期间,大连市城区内患有犬瘟热和犬细小病毒病两类犬传染病的病犬1659例,其中犬细小病毒病病1224例,年均就诊发病率14.8%;犬瘟热病435例,年均就诊发病率5.2%。本文通过流行病学及防治调查得出以下结果:1.犬细小病毒病发病率高于犬瘟热发病率,且五年间二者的发病率均有下降的趋势。2.犬细小病毒病和犬瘟热的发病与季节有关。经统计发现,每年4月开始发病数显着下降,5~10月份发病率较低,分别占全年发病总数的40.11%和39.77%,从11月份开始发病数逐渐上升,1~4月份和11~12月份发病数较高。3.犬细小病毒病例多发的行政区域是甘井子区和沙河口区,占所有患犬细小病毒病犬61.52%;犬瘟热病例主要分布于甘井子区,占所有患有犬瘟热病犬总数的49.20%。4.犬细小病毒病易感犬品种主要是贵兵犬、哈士奇、松狮犬,占比分别为17.40%、15.03%、17.24%;犬瘟热易感犬品种主要是吉娃娃、金毛犬、哈士奇,占比分别为21.84%、17.24%、14.71%。经统计发现,犬瘟热和犬细小病毒病纯种犬的发病率高于杂种犬。5.犬细小病毒病患病犬在小于1岁的犬中,以1~5月龄间的幼犬为发病主体,大于1岁的犬发病率较低;犬瘟热患病犬在小于1岁的犬中,以1月~6月龄间的幼犬为发病主体,大于1岁的犬发病率较低。6.从性别来看,公犬较母犬易感犬细小病毒病和犬瘟热。7.免疫犬发病数较未免疫犬的发病数低,且经人工被动免疫后的犬,发病后症状较轻,也易治愈。8.患有犬瘟热治愈率不高,存在愈后不良风险;犬细小病毒病的病犬死亡率低,治愈率较高。采用单克隆抗体治疗效果较好。

麻旭普[4](2020)在《犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗》文中提出犬瘟热由犬瘟热病毒引起,具有急性、高度接触性且致死性强等特点,是困扰宠物犬健康生长的重要疾病之一。有关犬瘟热的流行病学特征、临床症状及其有效的治疗措施仍是目前人们比较关注的问题。本文对犬瘟热的临床症状、实验室诊断及与典型传染病鉴别诊断,分析了犬的品种、年龄及接种疫苗对犬瘟热发病率的影响,并针对临床上不同类型犬瘟热的对症治疗及特异治疗方案进行了总结,这对于犬瘟热的防控、诊断和有效治疗具有重要的应用指导价值。

赵雨馨[5](2019)在《沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析》文中研究表明近年来,随着国民经济和城市化进程的迅速发展,宠物犬猫的饲养量不断增长,宠物的生活质量和健康情况也受到了更高的关注,但有关宠物流行病的相关研究却相对滞后。本研究通过调查沈阳地区宠物医院常见的传染病和寄生虫病的发病量,统计分析发现真菌病、细菌病、寄生虫病和病毒病的月平均发病量和月平均气温呈显着相关(P<0.001),并有两个月的时滞效应。并且利用这四种类型疾病2013至2017年的月平均发病量数据进行时间序列分析,建立了ARIMA模型。本研究中的流行病学统计分析表明,沈阳地区宠物医院接诊量最高的传染病为犬细小病毒病。犬细小病毒传播范围广、感染性强,对我国宠物犬、军犬警犬及野生动物和经济动物都造成严重的危害。本研究采用分子生物学方法从遗传进化方面对沈阳地区犬细小病毒进行了研究和探讨。9份沈阳地区犬细小病毒的唾液、血液和粪便样本收集于2017~2018年,通过提取的VP2基因和NS1基因进行PCR克隆测序,得到沈阳地区犬细小病毒的基因序列,分析其氨基酸位点突变情况,进行同源性比对及系统发育树构建。结果表明通过测序得到的五条序列全部为CPV-2c型;亲缘关系与亚型和地区有关,与北京地区、吉林地区分离到的毒株序列较近,而与意大利、日本国家的序列相对较远。VP2序列中有10个核苷酸突变(nt14、16、520、817、819、1016、1042、1109、1278及1490)导致9个氨基酸的突变(aa5、6、174、273、339、348、370、426、497)。测得的6条NS1序列与7条标准毒株序列进行比对,发现其中有27个核苷酸突变(nt67、178、196、206、210、336、433、555、616、726、905、969、1017、1059、1207、1267、1463、1488、1558、1625、1664、1715、1728、1736、1792、1891、1953)导致12个氨基酸的突变(aa23、60、66、69、145、206、302、403、423、460、520、555)。沈阳地区的犬细小病毒和其他地区相比,进化速率没有显着差异,共发现12个位点存在正选择。这些突变可能是导致病毒变异的原因,新发现的突变位点也为以后的研究提供了参考。

谈美玲[6](2018)在《犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较》文中进行了进一步梳理犬细小病毒病(Canine parvovirous disease,CPD)是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)引起的具有高度接触性烈性传染性疾病,是目前国内危害犬类的最主要的烈性传染病之一,对畜主造成较大的经济损失和情感伤害。目前市面上犬细小病毒单克隆抗体品牌繁多,价格差距较大。本实验通过对两种价格差异较大的犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的比较,分析价格因素对犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的影响。本实验在中山市三角镇多吉动物医院犬细小病毒病病例接诊较多的基础上,收集2017年3月至2017年12月广东省中山市三角镇多吉动物医院收治确诊犬细小病毒病病例,通过胶体金快速检验试纸条对广东省中山市三角镇多吉动物医院患病犬做出快速准确的诊断,采用犬细小病毒阳性犬和犬瘟热病毒阴性犬作为本研究用犬。然后以市场上的两种犬细小单克隆抗体为研究对象,把三角镇多吉动物医院接诊的细小病毒病患病犬按照畜主意愿分为两组,威特瑞犬细小病毒单克隆抗体组(A组)和世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体组(B组)在对患病犬其他治疗以及用药方法一致的基础上比较其对犬细小病毒病的治疗效果,分析价格因素对犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的影响。最后,本实验结果显示威特瑞犬细小病毒单克隆抗体组(价格较低)和世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体组(价格较高)两种单克隆抗体对不同年龄和不同品种的患病犬治疗效果基本相同,没有很大的差异。通过课题研究,对比两种单抗的治疗效果,为细小病毒病患病犬畜主选用细小病毒单克隆抗体提供依据,引导畜主选用治疗效果更好的单抗进行紧急治疗,增加患病犬的生存几率,减少犬养殖业的经济损失,减少畜主对宠物伴侣死亡造成的心理伤害,有利于社会和谐稳定。

文兆海[7](2018)在《狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究》文中进行了进一步梳理狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒感染引起的一种急性致死性人兽共患传染病,一旦发病死亡率几乎为100%。犬瘟热、犬细小亦是造成犬科动物发病死亡的重要传染病。目前,疫苗接种是预防狂犬病、犬瘟热、犬细小最为经济有效的方法。本研究团队利用反方向遗传学技术将狂犬病病毒的G基因提前,敲除其毒力基因,并将犬瘟热病毒和犬细小病毒的主要抗原基因CDV-N、CPV-VP2插入到狂犬病病毒基因组构建重组狂犬病病毒,有望获得基因重排减毒狂犬病疫苗株、犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的二联弱毒苗株、犬瘟热病毒N基因-犬细小病毒VP2基因重组狂犬病病毒的三联弱毒苗株。以期为将来制备狂犬病减毒口服活疫苗、犬瘟热-狂犬病二联口服弱毒活疫苗、犬瘟热-犬细小-狂犬病三联弱毒活疫苗奠定基础。首先,为了探究基因重排减毒狂犬病病毒、犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒(CDV-N重组狂犬病病毒)的拯救及鉴定。利用反向遗传学技术,通过脂质体转染的方法,将纯化后的全长重组质粒与4个辅助性表达质粒共转染BSR细胞;通过RT-PCR技术、间接免疫荧光试验对重组病毒进行鉴定。结果显示,RT-PCR检测出现与预期相符的目的片段;激光共聚焦显微镜观察发现,试验组出现了大量的荧光灶点,空白对照组未见绿色荧光;间接免疫荧光鉴定结果与RT-PCR检测结果相符,表明基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒拯救成功。其次,探究基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒对小鼠的免疫效果及安全性评估。利用ELISA试剂盒对狂犬病毒、犬瘟热病毒的特异性抗体进行检测。结果显示:三种重组狂犬病病毒株口服免疫产生的狂犬病毒抗体水平均显着高于亲本毒株Srv9口服免疫组。CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒均可刺激小鼠机体产生狂犬病毒抗体和犬瘟热病毒抗体;病理组织学检查结果表明口服免疫组的安全性优于注射免疫组。最后,探究了基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒对犬的口服免疫效果。利用ELISA试剂盒对狂犬病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒的特异性抗体进行定量检测。结果显示均能诱发机体产生其特异性抗体,且到第35天时各免疫组血清狂犬病毒抗体水平均高于世界卫生组织推荐的最低保护水平0.5 IU。

王璐[8](2018)在《携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建》文中提出犬瘟热病毒与犬细小病毒可以引起犬科、鼬科、大熊猫科等动物的烈性传染疾病,引起动物的死亡率可高达80%,给我国宠物饲养业、皮毛动物饲养业、野生动物保护领域均带来了严重的经济损失。目前国内外主要使用犬瘟热与犬细小病毒的弱毒疫苗对疾病进行防控,但该种类疫苗存在一些不足之处,例如生产成本比较高,弱毒疫苗具有毒力返强的隐患,面对不同的病毒变异株有其局限性等。本研究旨在构建一款高效安全低成本的新型疫苗。我们通过将犬瘟热与犬细小病毒的抗原基因插入到腺相关病毒(Adeno associated virus,AAV)基因组中,制备成可预防犬瘟热与犬细小疾病的腺相关病毒重组疫苗。本课题首先选择犬瘟热病毒的血凝蛋白基因、融合蛋白基因和犬细小病毒的衣壳蛋白基因作为抗原基因,并分别插入到腺相关病毒基因组中。再通过腺相关病毒三质粒包装系统获得携带各抗原基因的重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV)。经病毒滴度检测与外源蛋白表达检测后,将携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的rAAV混合,通过肌肉注射免疫6周龄的Balb/c小鼠,同时以英特威犬二联疫苗作为阳性对照,以rAAV-GFP病毒作为阴性对照。在首次免疫实验中,按照英特威犬二联疫苗的免疫程序免疫,即对小鼠进行三次免疫,每次免疫间隔14 d。免疫程序结束后每隔14 d对小鼠进行采血与中和抗体的检测。我们得到了良好的实验结果,之后为了进一步验证rAAV疫苗的高效性,按照与三次免疫实验相同的免疫途径与免疫剂量对实验小鼠进行一次免疫实验,免疫后继续监测中和抗体水平。三次免疫结果显示rAAV疫苗可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后所有时间点中rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价均高于阳性对照,最高时中和抗体效价大于1:500,是阳性对照的4倍。但在免疫后的所有时间点中,rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均与阳性对照接近,中和抗体效价均在1:100到1:200之间,一般认为当中和抗体效价大于1:100时机体便可以免受强毒的攻击。一次免疫结果显示rAAV疫苗依然可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后第6周rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价超过1:100,然而阳性对照产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价始终小于1:100,理论上我们认为阳性对照免疫失败,在免疫后第8周rAAV疫苗与阳性对照使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均超过1:100。在此次免疫实验中显示,rAAV疫苗仅需要对动物进行一次免疫,理论上就可以达到对动物的有效免疫。本研究的结果表明:rAAV疫苗可以激发小鼠的免疫系统并产生高水平的中和抗体;rAAV疫苗仅需对动物进行一次免疫在理论上就可以达到对动物的有效免疫;rAAV疫苗针对于犬瘟热病毒和犬细小病毒产生的免疫效果不平衡,针对于犬瘟热病毒的免疫效果强于针对犬细小病毒的免疫效果,这种现象可能是由抗原的选择、rAAV病毒混合的比例与滴度等原因造成的,可在后续工作中继续摸索病毒配比条件以更好的平衡针对两种病毒的免疫效果。综上所述携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的腺相关病毒重组疫苗具有安全高效、缩短免疫周期、成本低廉等优势,有望成为有效防控犬瘟热与犬细小疾病的新型疫苗。

黄华旭[9](2018)在《广西地区犬细小病毒的分子流行病学调查研究》文中进行了进一步梳理为了解广西地区犬细小病毒病的流行病学情况,及时发现和掌握疫情动态,现将2015年1月1日至2017年12月31日期间,在广西地区的11861例犬传染性病毒病(以犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)为主)及其中7107例犬细小病毒病单一感染和犬细小病毒病混合感染的门诊记录情况进行调查分析。结果表明:犬细小病毒感染存在性别、年龄、品种、季节和免疫状况等方面的差异,其中公犬感染率高,2-3月龄幼犬感染率高,纯种犬发病率高,3-5月份犬发病率高,未免疫接种的犬感染率高。本实验建立了快速检测犬细小病毒的PCR方法,最低能检测出5-6×6.1342ng/μL的病毒DNA。随机采集2016~2017年来自广西地区的120只患病动物应用胶体金免疫层析法确诊为犬细小病毒的临床病料,应用已建立的PCR检测方法对其进行二次检测,120只患病动物的病料均为阳性,检出率为100%。PCR方法检测CPV具有更高的灵敏性,而胶体金免疫层析法在临床操作上更加快捷简便。通过对广西不同地区的120份临床病料的CPV VP2全基因测序结果进行CPV亚型分析,发现CPV-2c亚型占59.17%(71/120),CPV--2亚型占25.83%(31/120),CPV-2b 亚型占 15.00%(18/120),表明 2016~2017年广西地区的CPV主要流行的亚型为CPV-2c和CPV-2a,而CPV-2b的比例较低,无CPV-2亚型,这也是广西地区首次发现CPV-2c;分离株之间以及与参考毒株之间的核苷酸序列、氨基酸序列的同源性都较高。通过对从PCR鉴定VP2全基因为阳性的120份样品(粪便)DNA随机挑选出10份样品进行CPV全基因测序,从测序结果可知全基因的核苷酸同源性较高,但氨基酸同源性有高有低,而VP2的核苷酸及氨基酸的同源性都较高,再结合临床症状观察可知,这10个样品所对应的病犬的临床症状都符合犬细小病毒病的临床症状,所以CPV起抗原决定簇作用的部位在VP2片段上,与报道相符合。综上所述,广西地区犬细小病毒病的分子流行病学调查及遗传差异分析,为探讨临床免疫失败的原因及有针对性地开发宠物用CPV疫苗奠定了理论基础。

李翠霞[10](2018)在《表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的研究》文中提出狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus,RV)引起的一种致死性人畜共患传染病,能引起人和哺乳动物的急性、渐进性致死性脑膜脑炎。全球每年约有59,000人以及数十万的动物死于狂犬病,其中95%以上的死亡病例发生在亚洲和非洲,99%以上的人狂犬病死亡病例是由感染RV的犬舔舐或咬伤引起。减少和控制人感染狂犬病病例数最有效的方法是提高犬的免疫覆盖率,当犬的免疫覆盖率达到70%便可从源头上控制、消除狂犬病。目前,狂犬病弱毒活疫苗已禁止生产和使用;灭活疫苗虽安全有效,但成本高昂。因此,研制一种高效、安全、价格低廉的动物狂犬病疫苗仍具有较高的应用价值和现实意义。犬瘟热(Canine distemper,CD)是由犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)引起的一种在犬科、鼬科、浣熊科以及其它肉食动物之间广泛传播的一种病毒性传染病。该病呈季节性流行,且宿主范围不断扩大,呈世界性分布,严重威胁畜牧养殖业的健康发展。CD弱毒疫苗能有效预防和控制该病在肉食动物之间的传播,应用广泛。反向遗传技术的发展和成熟使CDV作为疫苗载体成为可能。CDV也具备作为疫苗载体应用的潜力,以CDV为载体构建CDV/RV二联活载体疫苗可实现一苗两防、经济高效的提高狂犬病免疫覆盖率。本研究以本实验室分离的CDV Snyder Hill疫苗株为亲本毒株,建立其反向遗传操作系统,拯救成功的病毒rCDV和野生型CDV Snyder Hill在Vero细胞上保持相似的生长特性,在感染后120 h病毒滴度达到最高1×106.1.1 TCID50/mL。为探索CDV Snyder Hill株作为活病毒载体表达外源基因的潜力,在CDV基因组P、M之间插入外源基因EGFP构建重组病毒rCDV-EGFP,经生长曲线和遗传稳定性检测,重组病毒与亲本株rCDV的生长特性相似,且重组病毒在Vero细胞上连续传18代仍能高效、稳定表达EGFP,具有良好的遗传稳定性。在此基础之上,构建了重组病毒rCDV-RVG,经IFA、Western Bloting鉴定分析,RVG蛋白在重组病毒感染的细胞中正确、稳定表达,拯救的重组病毒与亲本株病毒在Vero细胞上具有相似的生长动力学曲线,病毒滴度最高可达1×105.7.7 TCID50/mL。犬免疫实验证明,重组病毒rCDV-RVG以105.5.5 TCID50/mL/只剂量免疫犬3 w后,犬体内均可产生特异性CDV、RV中和抗体,其中RV中和抗体平均值为21.71 IU/mL,远高于RV中和抗体保护临界值0.5 IU/mL。本研究结果表明,表达RVG蛋白的重组犬瘟热病毒rCDV-RVG具备作为狂犬病重组活载体疫苗的潜力。

二、肉用犬免疫失败发生犬瘟热疫情的调查(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、肉用犬免疫失败发生犬瘟热疫情的调查(论文提纲范文)

(1)警犬主要传染病流行情况及防控措施(论文提纲范文)

一、警犬主要传染病的流行趋势
    (一)寄生虫病较为常见
    (二)犬瘟热、犬细小病毒病仍有存在
    (三)狂犬病基本为零
    (四)犬窝咳不容忽视
二、影响警犬免疫失败的因素
    (一)母源抗体的影响
    (二)隔离检疫措施不到位
三、警犬主要传染病的防控措施
    (一)平时注意观察警犬状态
    (二)做好科学隔离和治疗
    (三)及时注射疫苗

(2)犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用(论文提纲范文)

摘要
Abstract
前言
    1 犬瘟热病毒的发病机制
        1.1 犬瘟热病毒的分子生物学特性
        1.2 犬瘟热病毒的流行病学
    2 犬瘟热临床症状
        2.1 呼吸道症状
        2.2 消化道症状
        2.3 神经症状
    3 犬瘟热病毒病的诊断方法
        3.1 临床诊断方法
        3.2 免疫学检测技术
        3.3 分子生物学检测
    4 犬瘟热病毒的疫苗预防现状
    5 本试验的目的与意义
材料与方法
    1.材料
        1.1 毒株、细胞与病料
        1.2 试剂
        1.3 犬瘟热病毒的扩繁
        1.4 引物的设计与合成
        1.5 病毒基因组RNA的提取
        1.6 一步法RT-PCR反应条件优化
        1.7 扩增产物的TA克隆、酶切与测序
        1.8 特异性试验
        1.9 敏感性试验
        1.10 重复性试验
        1.11 临床应用
结果
    1 犬瘟热病毒的扩繁
    2 扩增产物的检测与鉴定
    3 一步法RT-PCR反应体系与反应条件
    4 特异性试验结果
    5 敏感性试验结果
    6 重复性试验结果
    7 临床检测结果
讨论
    1 犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立
    2 扩增基因的选择
    3 犬瘟热病毒在机体内的增殖机制
    4 犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法发展趋势展望
    5 犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法与其他诊断方法比较
结论
参考文献
致谢
附录A (作者简介)
附录B (攻读学位期间发表论文目录)

(3)大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 犬瘟热
        1.1 犬瘟热病毒的生物学特征
        1.2 犬瘟热流行病学调查
        1.3 犬瘟热病的预防与治疗
    2 犬细小病毒病
        2.1 犬细小病毒的生物学特征
        2.2 犬细小病毒病流行病学调查
        2.3 犬细小病毒病预防与治疗
    3 研究的目的与意义
第二章 调查研究 大连市城区犬瘟热和犬细小病毒流行病学与调查
    1 材料与方法
        1.1 试验材料
        1.2 试剂盒检测方法
        1.3 PCR验证方法
        1.3.1 犬瘟热
        1.3.2 犬细小病毒
        1.4 统计分析
    2 结果与分析
    3 讨论
结论
参考文献
致谢

(4)犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1发病症状
    11.2诊断
        1.2.1临床诊断
        1.2.2实验室诊断
        1.2.3血清学检查
2 结果与分析
    2.1实验室诊断
    2.2与典型传染病的鉴别诊断
        2.2.1与犬狂犬病的鉴别
        2.2.2与犬细小病毒病的鉴别
        2.2.3与犬副伤寒的鉴别
    2.3犬品种、年龄及接种疫苗对犬瘟热发病率的影响
        2.3.1品种的影响
        2.3.2年龄的影响
        2.3.3接种疫苗的影响
        2.3.4临床对症治疗及特异治疗方案
3 讨论
4 结论

(5)沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析(论文提纲范文)

中文摘要
英文摘要
第一章 文献综述
    1.1 宠物猫狗的现状及宠物医院的发展
    1.2 宠物猫狗主要流行病
        1.2.1 犬细小病毒病
        1.2.2 犬瘟热
        1.2.3 犬瘟热病毒的实验室诊断
        1.2.4 犬瘟热病毒分离鉴定
        1.2.5 犬瘟热病毒分子生物学诊断方法
        1.2.6 犬冠状病毒病
        1.2.7 猫瘟
        1.2.8 犬猫皮肤病及其他寄生虫病
    1.3 ARIMA模型
    1.4 犬细小病毒VP2基因和NS1基因
    1.5 本研究的目的及意义
第二章 沈阳地区宠物猫狗流行病的季节性分析
    2.1 材料和方法
        2.1.1 数据搜集
        2.1.2 病例定义
        2.1.3 数据处理及统计方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 统计结果
        2.2.2 四种类型的流行病ARIMA模型
    2.3 讨论
        2.3.1 宠物猫狗传染病季节性变化影响因素分析
        2.3.2 辽宁地区犬细小病毒流行情况
    2.4 小结
第三章 犬细小病毒遗传进化分析
    3.1 材料和方法
        3.1.1 临床样本
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器
        3.1.4 犬细小病毒DNA的提取
        3.1.5 VP2、NS1基因扩增
        3.1.6 VP2、NS1基因序列拼接
        3.1.7 序列比对及病毒鉴定
        3.1.8 VP2及NS1序列分析及系统发育树构建
        3.1.9 分子进化分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 VP2、NS1基因扩增结果
        3.2.2 VP2、NS1基因同源性分析
        3.2.3 VP2、NS1基因系统发育树的构建
        3.2.4 亚型分析和VP2、NS1基因突变位点分析
        3.2.5 分子进化分析
    3.3 讨论
        3.3.1 我国CPV及各亚型流行情况
        3.3.2 犬细小病毒的分子进化分析
    3.4 小结
第四章 结论、创新点和展望
    4.1 结论
    4.2 创新点
    4.3 展望
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的学术论文

(6)犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较(论文提纲范文)

摘要
abstract
常用缩写词
1 引言
    1.1 犬细小病毒病原学
        1.1.1 病原分类
        1.1.2 分子生物学特征
    1.2 犬细小病毒病流行病学
    1.3 犬细小病毒的致病机理
    1.4 犬细小病毒的检测与诊断
        1.4.1 临床诊断
        1.4.2 实验室诊断
    1.5 犬细小病毒病的预防与清洁消毒
        1.5.1 预防
        1.5.2 清洁消毒
        1.5.3 中药治疗犬细小病毒病
    1.6 本研究的目的与意义
    1.7 犬细小病毒快速检验试纸条的原理
    1.8 犬细小病毒快速检验试纸条发展现状
        1.8.1 试纸条原料价格趋势
        1.8.2 试纸条价格趋势
        1.8.3 进口量分析
        1.8.4 出口量分析
        1.8.5 需求地域结构分析
    1.9 犬细小病毒单克隆抗体作用原理
2 材料与方法
    2.1 材料
    2.2 方法
        2.2.1 记录收集的犬细小病毒病信息
        2.2.2 韩国安捷AniGen犬细小病毒试纸条检测
        2.2.3 韩国安捷AniGen犬瘟热病毒测试纸检查
        2.2.4 诊断依据
        2.2.5 分组
        2.2.6 治疗
        2.2.7 护理
        2.2.8 治愈判定
3 结果
    3.1 发病数与治愈数的关系
    3.2 发病数与发病年龄的关系
    3.3 发病年龄与治愈率
    3.4 发病年龄与死亡率的关系
    3.5 发病年龄对抗体选择的影响
    3.6 抗体选择与品种的关系
    3.7 发病数与季节的关系
    3.8 疫苗存放与疫苗效果的关系
    3.9 治愈效果与疫苗接种的关系
4 讨论
    4.1 韩国安捷AniGen快速检测试纸原理与选用原因
    4.2 威特瑞犬细小病毒单克隆抗体选用原因
    4.3 世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体(PVab)选用原因
    4.4 治愈效果分析
    4.5 结论与建议
        4.5.1 结论
        4.5.2 建议
致谢
参考文献

(7)狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究(论文提纲范文)

摘要
abstract
英文缩略词表
第1章 绪论
    1.1 狂犬病病毒的基因组结构及基本特性
    1.2 狂犬病流行病学
    1.3 狂犬病发病机理
    1.4 狂犬病的临床症状
    1.5 狂犬病疫苗的研究
    1.6 犬瘟热病毒概述
    1.7 犬瘟热流行病学
    1.8 犬瘟热发病机理
    1.9 犬瘟热的临床症状
    1.10 犬瘟热疫苗的研究
    1.11 犬细小病毒概述
    1.12 犬细小流行病学
    1.13 犬细小发病机理
    1.14 犬细小的临床症状
    1.15 犬细小疫苗的研究
    1.16 本论文研究目的及意义
第2章 基因重排减毒狂犬病病毒的拯救及遗传稳定性的研究
    2.1 材料
    2.2 方法
    2.3 结果
    2.4 讨论
第3章 犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救及其毒力的研究
    3.1 材料
    3.2 方法
    3.3 结果
    3.4 讨论
第4章 狂犬病毒减毒苗、二联苗、三联苗对小鼠的免疫效果及病理学评估
    4.1 材料
    4.2 方法
    4.3 结果与分析
    4.4 讨论
第5章 狂犬病毒减毒苗、二联苗、三联苗对犬口服免疫效果的初步研究
    5.1 材料
    5.2 方法
    5.3 结果与分析
    5.4 讨论
第6章 结论
参考文献
附录 常用试剂的配制
致谢
作者简介

(8)携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建(论文提纲范文)

摘要
Abstract
缩略词表(Abbreviation)
第1章 文献综述
    1.1 犬瘟热病毒研究进展
        1.1.1 犬瘟热病毒流行概述与病理特征
        1.1.2 犬瘟热病毒病原学特征
        1.1.3 犬瘟热病毒的诊断
        1.1.4 犬瘟热病毒疫苗研究现状
    1.2 犬细小病毒研究进展
        1.2.1 犬细小病毒流行概述与病理特征
        1.2.2 犬细小病毒病原学特征
        1.2.3 犬细小病毒的诊断
        1.2.4 犬细小病毒疫苗研究现状
    1.3 腺相关病毒研究进展
        1.3.1 腺相关病毒生物学特征
        1.3.2 腺相关病毒的应用
第2章 目的与意义
第3章 实验材料与方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 质粒、病毒、细菌、细胞、疫苗
        3.1.2 实验动物
        3.1.3 实验仪器及耗材
        3.1.4 主要的工具酶,抗体,试剂以及血清
        3.1.5 主要的培养基、抗生素、缓冲液及其配置
        3.1.6 主要的生物学软件
    3.2 实验方法
        3.2.1 氯化钙法制备大肠杆菌感受态
        3.2.2 相关引物的设计与合成
        3.2.3 犬瘟热病毒的培养
        3.2.4 犬瘟热病毒TCID50检测
        3.2.5 犬细小病毒的培养
        3.2.6 犬细小病毒TCID50检测
        3.2.7 犬瘟热病毒H基因与F基因的获得
        3.2.8 携带犬瘟热病毒H基因、F基因和犬细小病病毒VP2基因的腺相关病毒质粒载体的构建
        3.2.9 rAAV病毒的包装
        3.2.10 rAAV滴度测定
        3.2.11 Westernblot检测CDV-H、CDV-F、CPV-VP2蛋白的表达
        3.2.12 细胞间接免疫荧光
        3.2.13 小鼠免疫实验
        3.2.14 小鼠血清的提取与分离
        3.2.15 中和抗体水平检测
第4章 结果与分析
    4.1 犬瘟热病毒与犬细小病毒的培养
    4.2 抗原基因CDV-H、CDV-F、CPV-VP2的获得
    4.3 携带抗原基因的rAAV质粒的构建
    4.4 rAAV病毒的包装
    4.5 rAAV滴度检测
    4.6 抗原蛋白表达检测
    4.7 细胞间接免疫荧光检测抗原蛋白在犬细胞中的表达情况
    4.8 中和抗体水平检测
        4.8.1 抗犬瘟热病毒中和抗体水平的检测
        4.8.2 抗犬细小病毒中和抗体水平的检测
第5章 讨论
    5.1 rAAV疫苗免疫效果分析
    5.2 rAAV疫苗的优势
    5.3 展望
第6章 结论
参考文献
致谢

(9)广西地区犬细小病毒的分子流行病学调查研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
缩写符号说明
第一章 文献综述
    1.1 犬细小病毒的病原学研究进展
        1.1.1 犬细小病毒的发现与命名
        1.1.2 犬细小病毒的进化
    1.2 CPV的生物学特性
        1.2.1 形态结构与理化特性
        1.2.2 血凝性
        1.2.3 CPV基因组结构及编码蛋白
    1.3 犬细小病毒病的研究进展
        1.3.1 流行病学
        1.3.2 致病机理
        1.3.3 临床症状
    1.4 CPV的检测技术
        1.4.1 分离与鉴定
        1.4.2 电镜与免疫电镜
        1.4.3 免疫学诊断
        1.4.4 PCR技术
    1.5 防制措施
    1.6 小结
第二章 广西地区犬细小病毒病流行病学调查
    2.1 材料和方法
        2.1.1 调查对象
        2.1.2 调查方法
        2.1.3 临床诊断
        2.1.4 免疫学诊断
    2.2 结果与分析
        2.2.1 犬细小病毒病的感染情况及在犬传染性病毒病(以犬瘟热、犬细小病毒病及犬冠状病毒病为主)中所占的比例(结果见表2-1)
        2.2.2 不同年份犬细小病毒病的感染情况(结果见表2-2)
        2.2.3 不同性别犬的感染情况(结果见表2-3)
        2.2.4 不同年龄犬的感染情况(结果见表2-4)
        2.2.5 不同品种犬的感染情况(结果见表2-5)
        2.2.6 不同季节犬的感染情况(结果见表2-6)
        2.2.7 不同免疫状况犬的感染情况(结果见表7)
    2.3 讨论
        2.3.1 发病率
        2.3.2 不同年份犬细小病毒病的感染情况
        2.3.3 不同性别犬的感染情况
        2.3.4 不同年龄犬的感染情况
        2.3.5 不同品种犬的感染情况
        2.3.6 不同季节犬的感染情况
        2.3.7 不同免疫状况犬的感染情况
        2.3.8 预防
    2.4 结论
第三章 犬细小病毒病PCR检测方法的应用
    3.1 材料
        3.1.1 引物的设计与合成
        3.1.2 毒株与细菌
        3.1.3 主要试剂与耗材
        3.1.4 主要仪器
        3.1.5 临床病料来源
    3.2 方法
        3.2.1 病料处理
        3.2.2 犬细小病毒全基因组的提取
        3.2.3 PCR反应体系的建立
        3.2.4 PCR检测的特异性
        3.2.5 PCR检测的敏感性
        3.2.6 临床病料的PCR检测
    3.3 结果
        3.3.1 PCR反应体系的建立
        3.3.2 PCR检测的特异性
        3.3.3 PCR检测的敏感性
        3.3.4 PCR检测方法在临床病料中的应用
        3.3.5 PCR检测方法与胶体金层析法的比较
    3.4 讨论
第四章 VP2全基因的分子流行病学分析
    4.1 材料
        4.1.1 引物
        4.1.2 主要试剂和耗材
        4.1.3 主要仪器
    4.2 方法
        4.2.1 CPV VP2全基因组的PCR反应体系和循环参数
        4.2.2 阳性样品送检
        4.2.3 测序分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 PCR扩增VP2全基因
        4.3.2 样品VP2全基因分子流行病学调查
    4.4 讨论
第五章 CPV全基因的分子流行病学分析
    5.1 材料
        5.1.1 引物
        5.1.2 主要试剂和耗材
        5.1.3 主要仪器
    5.2 方法
        5.2.1 全基因组PCR反应体系和循环参数
        5.2.2 阳性样品送检
        5.2.3 测序分析
    5.3 结果与分析
        5.3.1 PCR扩增全基因
        5.3.2 样品全基因分子流行病学调查
        5.3.3 样品VP2分子流行病学调查
    5.4 讨论
第六章 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况

(10)表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的研究(论文提纲范文)

摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 狂犬病概况
        1.1.1 狂犬病病毒分子特征
        1.1.2 狂犬病的流行与传播
        1.1.3 犬用狂犬病疫苗现状
    1.2 犬瘟热概况
        1.2.1 犬瘟热病毒分子生物学特征
        1.2.2 犬瘟热疫苗现状
        1.2.3 犬瘟热病毒反向遗传技术的发展
    1.3 本研究的目的与意义
第二章 犬瘟热病毒Snyder Hill株反向遗传操作系统的建立
    2.1 材料
        2.1.1 病毒株、细胞和质粒
        2.1.2 主要试剂与仪器
        2.1.3 引物设计与合成
    2.2 方法
        2.2.1 CDV Snyder Hill株病毒基因组的提取、反转录和PCR
        2.2.2 CDV Snyder Hill株全基因组测序
        2.2.3 CDV Snyder Hill株基因序列拼接与H基因序列分析
        2.2.4 CDV Snyder Hill株病毒基因组全长cDNA克隆的构建
        2.2.5 CDV Snyder Hill株辅助质粒的构建
        2.2.6 CDV Snyder Hill株病毒拯救
        2.2.7 拯救病毒的鉴定
        2.2.7.1 RT-PCR鉴定
        2.2.7.2 间接免疫荧光(IFA)鉴定
        2.2.7.3 Western Bloting鉴定
        2.2.8 种毒制备与病毒滴定
        2.2.9 病毒生长动力学曲线的测定
    2.3 结果
        2.3.1 CDV Snyder Hill疫苗株H基因同源性分析
        2.3.2 CDV Snyder Hill株基因组全长cDNA克隆及其辅助质粒构建
        2.3.3 CDV Snyder Hill株病毒拯救与鉴定
        2.3.3.1 RT-PCR
        2.3.3.2 IFA
        2.3.3.3 Western Bloting
        2.3.4 rCDV病毒生长曲线的测定
    2.4 讨论
第三章 表达绿色荧光蛋白(EGFP)重组犬瘟热病毒Snyder Hill疫苗株的构建及其生物学特性研究
    3.1 材料
        3.1.1 病毒、细胞和质粒
        3.1.2 主要试剂及仪器
        3.1.3 引物的设计与合成
    3.2 方法
        3.2.1 表达EGFP的重组CDV Snyder Hill株病毒基因组cDNA克隆的构建
        3.2.2 表达EGFP外源基因的重组病毒的拯救
        3.2.3 重组病毒rCDV-EGFP的鉴定
        3.2.3.1 RT-PCR鉴定
        3.2.3.2 IFA鉴定
        3.2.3.3 Western Bloting鉴定
        3.2.4 重组病毒rCDV-EGFP生长曲线的测定
        3.2.5 rCDV-EGFP病毒遗传稳定性的检测
    3.3 结果
        3.3.1 表达EGFP重组CDV Snyder Hill株病毒基因组全长cDNA克隆构建
        3.3.2 表达EGFP外源基因的重组犬瘟热病毒的拯救
        3.3.3 重组病毒rCDV-EGFP的鉴定
        3.3.3.1 RT-PCR
        3.3.3.2 IFA
        3.3.3.3 Western Bloting
        3.3.4 重组病毒rCDV-EGFP体外生长特性
        3.3.5 rCDV-EGFP遗传稳定性检测
    3.4 讨论
第四章 表达狂犬病病毒G蛋白(RVG)重组犬瘟热病毒Snyder Hill疫苗株的构建及其生物学特性与免疫原性研究
    4.1 材料
        4.1.1 病毒、细胞、质粒和实验动物
        4.1.2 主要试剂及仪器
        4.1.3 引物的设计与合成
    4.2 方法
        4.2.1 表达RVG的重组CDV Snyder Hill株病毒基因组cDNA克隆的构建
        4.2.2 表达RVG的重组病毒的拯救
        4.2.3 重组病毒rCDV-RVG的鉴定
        4.2.3.1 RT-PCR鉴定
        4.2.3.2 IFA鉴定
        4.2.3.3 Western Bloting鉴定
        4.2.4 重组病毒rCDV-RVG生长曲线的测定
        4.2.5 重组病毒rCDV-RVG免疫比格犬
        4.2.6 中和试验
    4.3 结果
        4.3.1 表达RVG重组CDV Snyder Hill株病毒基因组全长cDNA克隆构建
        4.3.2 重组病毒rCDV-RVG的鉴定结果
        4.3.2.1 RT-PCR
        4.3.2.2 IFA
        4.3.2.3 Western Bloting
        4.3.3 重组病毒rCDV-RVG体外生长特性
        4.3.4 重组病毒rCDV-RVG对犬的免疫效力
    4.4 讨论
第五章 全文结论
参考文献
附录
致谢
作者简历

四、肉用犬免疫失败发生犬瘟热疫情的调查(论文参考文献)

  • [1]警犬主要传染病流行情况及防控措施[J]. 程建国,叶俊奇. 中国工作犬业, 2021(08)
  • [2]犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用[D]. 李文佳. 延边大学, 2021
  • [3]大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查[D]. 温慧明. 沈阳农业大学, 2020(05)
  • [4]犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗[J]. 麻旭普. 现代畜牧兽医, 2020(05)
  • [5]沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析[D]. 赵雨馨. 沈阳农业大学, 2019(03)
  • [6]犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较[D]. 谈美玲. 华南农业大学, 2018
  • [7]狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究[D]. 文兆海. 新疆农业大学, 2018(05)
  • [8]携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建[D]. 王璐. 华中农业大学, 2018(01)
  • [9]广西地区犬细小病毒的分子流行病学调查研究[D]. 黄华旭. 广西大学, 2018(01)
  • [10]表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的研究[D]. 李翠霞. 中国农业科学院, 2018(12)

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肉犬免疫失败致犬瘟热流行调查
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