一、门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究（论文文献综述）
李爽[1]（2020）在《益气活血方有效成分抑制巨噬细胞氧化亢进，防治门脉高压症的药理研究》文中研究指明门静脉高压（PH）是临床慢性肝病的常见难治并发症,以门脉的血流增多与阻力升高为主要病理生理特征,缺乏特异性治疗药物。汇管区巨噬细胞氧化亢进,超氧化物歧化酶3（SOD3）活性降低,引起一氧化氮（NO）和前列环素（PGI2）等舒张物生物利用度降低,是门脉压力升高的主要因素。本课题前期建立了恒流测压大鼠门脉离体灌流系统,发现益气活血方有效成分丹酚酸B和甘草酸二铵可有效降低门脉压力,缓解PH。因此,在前期基础上,本研究采用四氯化碳（CC14）诱导复制大鼠PH模型,以氯膦酸二钠脂质体清除肝脏巨噬细胞,与未清除巨噬细胞大鼠配对比较,确定巨噬细胞激活参与PH。在离体灌流门脉系统上,以盐酸氨基胍抑制内皮型一氧化氮合酶（iNOS）,塞来昔布抑制2型环氧合酶（COX-2）,观察舒张物生物利用度,并通过检测SOD3酶活性等,探索丹酚酸B和甘草酸二铵防治PH的药理机制。1.巨噬细胞参与大鼠门脉高压症[目的]观察巨噬细胞激活在大鼠门脉高压中的作用。[方法]Wistar雄性大鼠40只,随机分为2组,对照组每周2次皮下注射橄榄油（3mL/kg）,模型组每周2次皮下注射40%CCl4（3mL/kg）;d70-105,将模型大鼠分为2亚组,巨噬细胞未清除与清除组,半数动物每周1次尾静脉注射PBS脂质体（0.3mL/kg）,另半数动物尾静脉注射氯膦酸二钠脂质体（15mg/kg）。d105,各组大鼠腹主动脉取血,检测在体门脉压力,单核细胞数量,血清sCD163和趋化因子2（CCL2）含量,免疫组化检测肝脏CD163阳性表达。[结果]PBS脂质体组内,与对照组比较,模型组大鼠门脉压力升高,单核细胞个数和百分比升高,血清CD163和CCL2含量增加,汇管区CD163免疫组化阳性表达量升高:氯膦酸二钠脂质体组内,与对照组比较,模型组大鼠单核细胞个数和百分比升高,门脉压力升高,血清CD163和CCL2含量增加,汇管区CD163免疫组化阳性表达量升高;各组大鼠配对比较,对照大鼠中,巨噬细胞清除组较未清除组血浆单核细胞个数和百分比降低,血清CD163含量降低和CCL2含量,模型大鼠中,巨噬细胞清除组较未清除组单核细胞个数和百分比降低,门脉压力降低,血清CD163含量、CCL2含量、CD163阳性表达量均下降。[结论]巨噬细胞参与大鼠门脉高压。2.益气活血方有效成分防治大鼠门脉高压药效[目的]观察丹酚酸B和甘草酸二铵防治大鼠门脉高压的药效。[方法]Wistar雄性大鼠132只分为对照组、模型组、阳性组、丹酚酸B组、甘草酸二铵组和联合组,对照组每周2次皮下注射橄榄油（3mL/kg）,模型组和治疗组每周2次皮下注射40%CC14（3mL/kg）;d56,对照组和模型组每天灌胃0.01%CMC（5mL/kg）,各治疗组分别给予卡托普利、丹酚酸B、甘草酸二铵、丹酚酸B+甘草酸二铵（5mL/kg）灌胃,d70,将各组大鼠再分为2亚组,巨噬细胞未清除与清除组,每周1次分别尾静脉注射PBS脂质体（0.3mL/kg）或氯膦酸二钠脂质体（15mg/kg）。d105,称量大鼠体重,麻醉后,收集腹水,检测在体门静脉压力,腹主动脉取血检测肝功,称量肝脏、脾脏重量,苏木精-伊红（HE）染色和Masson染色,观察肝脏病理变化及胶原沉积,形态计量假小叶个数及体积比和胶原纤维构成比。[结果]治疗各组较模型组比较,可显着减少腹水量,缓解肝脏病理变化,减少假小叶形成及胶原纤维沉积,降低在体门静脉压力,改善肝功能;巨噬细胞清除同未清除组配对比较,阳性药、丹酚酸B、甘草酸二铵和联合组巨噬细胞清除组大鼠假小叶个数减少,平均体积增加,胶原纤维沉积比减少。[结论]丹酚酸B和甘草酸二铵能有效治疗大鼠门脉高压,且疗效具有巨噬细胞依赖趋势。3.益气活血方有效成分抑制巨噬细胞氧化亢进防治门脉高压药理[目的]探索丹酚酸B和甘草酸二铵抑制汇管区巨噬细胞氧化亢进,防治大鼠门脉高压的药理机制。[方法]Wistar雄性大鼠144只分为对照组、模型组、阳性组、丹酚酸B组、甘草酸二铵组和联合组,对照组每周2次皮下注射橄榄油（3mL/kg）,模型组和治疗组每周2次皮下注射40%CC14（3mL/kg）;d56,对照组和模型组每天灌胃0.01%CMC（5mL/kg）,各治疗组分别给予卡托普利、丹酚酸B、甘草酸二铵、丹酚酸B+甘草酸二铵（5mL/kg）灌胃治疗,d70,将各组大鼠分为2亚组,巨噬细胞未清除与清除组,每周1次分别尾静脉注射PBS脂质体（0.3mL/kg）,另半数动物尾静脉注射氯膦酸二钠脂质体（15mg/kg）。d105,大鼠麻醉后,测量在体门脉压力,进行离体门脉灌流,测量NO和PGI2利用度,取左叶肝脏,采用免疫组化法测定肝脏NADPH氧化酶2（NOX2）,SOD3,iNOS,诱导型一氧化氮合成酶（eNOS）阳性表达量,肝脏匀浆,检测SOD3酶活性,NOX2和SOD3蛋白表达量。[结果]单体各组较模型组比较,门脉压力下降,NOX2和iNOS表达减少,eNOS和SOD3表达增加,SOD3酶活性升高,舒张物NO和PGI2利用度升高;巨噬细胞清除后同未清除组配对比较,模型组门脉压力下降,NOX2和iNOS表达减少,eNOS和SOD3表达增加,SOD3酶活性升高,舒张物NO和PGI2利用度升高;各中药单体组门脉压力下降,NOX2、iNOS和eNOS表达量下降,丹酚酸B和联合组NO和PGI2利用度升高,甘草酸二铵组NO和PGI2利用度降低。[结论]巨噬细胞参与门脉高压发生与发展,丹酚酸B和甘草酸二铵提高舒张物利用度,保护抗氧化酶活性,回降门脉压,防治门脉高压,巨噬细胞为丹酚酸B治疗门脉高压作用靶点之一。
彭滔[2]（2019）在《GATA6/LOXL2复合体以及MACC1促进胆管癌血管生成的机制研究》文中指出研究背景:胆管癌（CCA）是仅次于肝细胞癌的第二常见肝胆系统肿瘤,预后差,其总体发病率在世界范围内呈上升趋势。对于早期CCA患者,手术切除是首选的治疗方案,但只有部分患者（约35%）适合于具有疗效的外科切除。因此,更好地深入了解CCA的分子特征和生物学行为将有助于寻找新的分子靶点治疗CCA。血管生成是由已有的血管系统形成新的血管过程,已成为恶性肿瘤的一个公认标志。肿瘤通过生成的血管提供营养和氧气维持迅速的生长和转移。血管内皮生长因子A（VEGFA）在肿瘤血管生成中起着关键作用,并与许多实体癌的肿瘤血管密度有关。高微血管密度（MVD）的实体瘤患者比低微血管密度的实体瘤患者生存期短。抗血管生成治疗已被临床应用于各种实体瘤,包括CCA。尽管如此,抗血管生成治疗对癌症的临床疗效仍不令人满意,而且临床副作用、细胞毒性、耐药和患者复发率均较高。因此,迫切需要理解血管生成的新机制。GATA结合蛋白6（GATA6）是GATA结合蛋白家族的一员,包含两个高度保守的含锌指转录因子。在胚胎发育期间GATA6对心血管系统、消化系统和其他组织的增殖、分化和发育至关重要。肿瘤发生与胚胎期基因激活密切相关,GATA6的过度表达可促进胃癌、结直肠癌、乳腺癌以及胆管癌的进展。一些研究表明GATA6与肿瘤血管生成有关,但其分子机制尚未研究。赖氨酰氧化酶样蛋白2（LOXL2）是细胞外基质（ECM）修饰酶LOX家族的成员,其家族包括原型LOX和四种不同的LOX样蛋白（LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4）。LOXL2的C端区域负责其酶活性,N端包含四个富含半胱氨酸结构域的清道夫受体（SRCR）,这些区域被认为与蛋白质-蛋白质相互作用有关。已有研究表明,核内LOXL2可与某些转录因子协同调节上皮间质转换（EMT）,促进肿瘤转移。此外,靶向抑制LOXL2可降低肿瘤和眼科疾病的血管生成。然而,在CCA中LOXL2的血管生成机制尚未研究。结肠癌转移相关基因1（MACC1）在2009年首次通过全基因组在人类结肠癌组织和转移组织中搜索差异表达的基因而被发现。既往已有报道,MACC1 mRNA表达可能是结直肠癌、肺腺癌、胰腺癌、肝门部胆管癌复发及无病生存的独立预后指标。MACC1通过肝细胞生长因子（HGF）/c-Met/MAPK信号通路促进癌细胞的增殖、迁移和侵袭性。先前的研究表明MACC1参与胃癌和宫颈癌的血管生成。然而,MACC1与CCA中血管生成的相关性尚未被研究。在我们的第一部分研究中,我们使用生物信息学分析表明GATA6可能与VEGFA的启动子区域结合。我们证实了GATA6转录调控了VEGFA的表达,并阐明了一种新的CCA血管生成机制,LOXL2与GATA6结合,上调VEGFA的表达,促进血管生成和肿瘤生长。在第二部分研究中,我们也发现CCA中MACC1和VEGFA显着上调,并且MACC1和VEGFA表达水平呈正相关,我们进一步证实了MACC1调控VEGFA的表达和分泌,促进了CCA细胞的血管生成。研究方法:第一部分1.分析TCGA和GEO数据库中GATA6和LOXL2的mRNA表达,以及与VEGFA的相关性。2.收集2013年至2016年西南医院手术切除91例CCA和31例癌旁患者的样本。这些患者术前或术后均未接受放疗或化疗。通过中国芯超公司将91例癌组织和31例癌旁石蜡样品组织制作成组织芯片（TMA）,采用免疫组化方法分析GATA6、LOXL2、VEGFA和MVD（CD34）在TMA上的表达水平。3.采用Kaplan-Meier曲线和Cox回归分析GATA6/LOXL2表达与总生存率和无病生存率之间的相关性。在TMA中分析了GATA6/LOXL2表达与VEGFA表达和MVD的相关性。4.实时定量qPCR和Western Blotting检测干预GATA6和LOXL2表达后对VEGFA的影响。用激光共聚焦扫描显微镜检测GATA6和LOXL2在胆管癌细胞的共定位。采用免疫共沉淀法（Co-IP）分析了GATA6与LOXL2的相互作用。采用双荧光素酶报告基因和染色质免疫沉淀法（ChIP）分析了GATA6与LOXL2转录激活VEGFA。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测VEGFA的分泌水平。通过基质胶血管形成实验检测对血管生成的影响。5.我们构建了两个缺失或保留SRCR结构域的LOXL2缺失突变体（Flag-LOXL2-Δ1:删除氨基酸548-774;Flag-LOXL2-Δ2:删除氨基酸1-547）和全长LOXL2（Flag-LOXL2-full）,以进一步探讨LOXL2和GATA6之间的相互作用位点。Co-IP实验检测不同的LOXL2突变体与GATA6的相互作用,并用双荧光素酶报告基因检测不同的LOXL2突变体对VEGFA启动子活性影响。6.我们利用裸鼠皮下肿瘤进一步验证GATA6/LOXL2复合体对VEGFA的调控及对血管生成、肿瘤生长的影响。通过手术切除皮下肿瘤,然后进行测量。肿瘤切片后行苏木精-伊红（HE）和IHC染色。第二部分1.TCGA（网址:https://cancergenome.nih.gov/）和GEO（网址:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）的数据,进入编号:GSE76297,GSE89749,数据库是免费公开下载的。比较CCA组织与正常组织间MACC1和VEGFA的mRNA表达差异,并分析MACC1与VEGFA表达的关系2.2010年至2016年在西南医院肝胆外科接受手术的122例CCA患者中,有31例癌旁组织标本。2018年手术中获得7例成对的CCA和癌旁组织,并立即保存在液氮中。所有患者均未接受新辅助化疗或肝移植。采用real-time qPCR和Western blot技术检测7对CCA中MACC1和VEGFA的表达水平。采用免疫组织化学方法（IHC）检测石蜡包埋CCA样品中MACC1、VEGFA和MVD（CD34）的表达水平。3.采用Kaplan-Meier曲线和Cox回归分析MACC1和VEGFA表达与总生存率的关系,分析MACC1表达与VEGFA表达及MVD的关系。4.采用real-time qPCR和Western blot检测干预MACC1表达对VEGFA的影响。通过共聚焦激光扫描显微镜检测MACC1和VEGFA表达的定位。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测VEGFA的分泌水平。HUVECs成管实验分析各组血管腔形成的差异。研究结果:第一部分1.数据中分析发现GATA6和LOXL2的mRNA表达在胆管癌中上调,并且与VEGFA的表达相关。2.免疫组化分析表明GATA6主要在细胞核表达,而LOXL2在细胞核和细胞质中均都表达。两种蛋白染色方法的评分只计算核内表达。在TMA中所有癌旁标本的胆管上皮GATA6、LOXL2和VEGFA染色均为阴性。在TMA中的癌组织,38例GATA6和LOXL2弱阳性或强阳性样本定义为双阳性,标记为GATA6/LOXL2阳性;28例定义为双阴性,标记为GATA6/LOXL2阴性。VEGFA表达在细胞浆中。免疫组化观察到VEGFA阳性表达（35/66）和阴性表达（31/66）。CD34在血管内皮细胞中表达并标记MVD。在38个GATA6/LOXL2阳性和28个GATA6/LOXL2阴性染色样本中,MVD的平均值（定义为截止值）为23.69/mm2。免疫组化观察到高MVD（40/66）和低MVD（26/66）。3.Kaplan-Meier分析显示,与GATA6/LOXL2阴性的CCA患者相比,GATA6/LOXL2阳性的CCA患者总生存率更差（log rank P=0.01）,无病生存率更短（log rank P=0.02）。利用Cox回归分析评估年龄、性别、肿瘤位置、TNM分期和GATA6/LOXL2表达的危险比（HRs）,我们观察到GATA6/LOXL2的表达是总生存率和无病生存率的独立预测因子（HR=1.871,95%CI=1.070-3.271,P=0.028;HR=1.781,95%CI=1.013-3.129,P=0.045）。另外,TNM期（ⅢⅣ）是总生存率和无病生存率的另一个独立预测因子（HR=2.333,95%CI=1.3114.150,P=0.004;HR=1.861,95%CI=1.0533.291,P=0.033）。在TMA中的同一样本,我们观察到38个GATA6/LOXL2阳性组织中有25个（65.8%）VEGFA阳性组织,27个（71.1%）高MVD组织。因此,GATA6/LOXL2与VEGFA（P=0.02）和MVD（P=0.04）呈正相关。4.细胞实验表明GATA6和LOXL2敲除可显着降低QBC939细胞中的VEGFA蛋白水平,GATA6和LOXL2过表达可增加RBE细胞中的VEGFA蛋白水平。在CCA细胞中也观察到相同的mRNA水平变化。共聚焦激光扫描显微镜检测表明,GATA6位于细胞核内,LOXL2位于细胞核和细胞质内。这些结果与CCA组织的IHC结果一致。免疫共沉淀实验证实了GATA6和LOXL2在CCA细胞系中相互结合,通过这种相互作用转录调节VEGFA的表达和分泌,促进了血管的形成。5.基于Co-IP实验结果,在CCA细胞中,GATA6与LOXL2的SRCR结构域结合不依赖于催化结构域。并且,Flag-LOXL2-Δ1和Flag-LOXL2-full增加了VEGFA启动子活性;然而,LOXL2-Δ2没有增加VEGFA启动子活动。此外,QBC939细胞中GATA6或LOXL2的下调降低了LOXL2与GATA6的相互作用。基于这些结果,说明LOXL2的SRCR域与GATA6相互作用,增加VEGFA启动子活性。6.体内分析进一步验证了GATA6/LOXL2可促进VEGFA的表达、血管生成和肿瘤生长。第二部分1.与正常对照组织相比,数据集中CCA组织和配对的癌旁组织中MACC1和VEGFA显着上调。在TCGA、GSE76297和GSE89749数据集中,MACC1与VEGFA显着相关。2.与癌旁组织比较,7例冰冻CCA组织中MACC1和VEGFA的蛋白和mRNA水平均升高。免疫组化显示,CCA患者中,MACC1高表达和VEGFA高表达分别为53.3%（65/122）和54.9%（67/122）。MACC1/VEGFA共同高表达43例,MACC1/VEGFA共同低表达33例。然而,所有31例癌旁组织中MACC1和VEGFA均为低表达。122例CCA患者中,高MVD 56例（45.9%）,低MVD 66例（54.1%）。3.Kaplan-Meier分析显示,MACC1和VEGFA的高表达与总生存率降低显着相关（log-rank P<0.01和P<0.05）。MACC1-高/VEGFA-高表达组的总体生存率也低于MACC1-低/VEGFA-低表达组（log-rank P<0.001）。Cox回归分析显示,MACC1和淋巴结转移是CCA患者总体生存的独立预测因子。高MACC1表达的CCA组织中有66.2%（43/65）高表达VEGFA（P<0.01）,高MACC1表达的CCA组织中有60%（39/65）高MVD。4.激光共聚焦扫描显微镜显示,MACC1和VEGFA在胞质和细胞核中均有表达。Western blotting和real-time qPCR证实敲除MACC1可显着下调两种CCA细胞系VEGFA的蛋白和mRNA表达。ELISA结果表明,MACC1敲除显着降低了VEGFA的分泌水平。HUVECs成管实验显示,在两组CCA细胞中,MACC1敲低组的条件培养基的成管数均显着低于对照组（P<0.01和P<0.01）。研究结论:总之,我们的研究证明了一种新的分子机制,即LOXL2和GATA6相互作用促进血管生成,复合体结合在VEGFA的启动子区域从而增强VEGFA的表达,促进了血管生成以及促进肿瘤生长。小分子细胞渗透性抑制剂治疗CCA以及患者分层的预后标记候选可能具有很大的价值。除此之外,我们也发现CCA中MACC1和VEGFA表达上调,而MACC1和VEGFA的高表达预示着较差的生存率,并且MACC1是一个独立的生存预测因子,通过上调VEGFA促进CCA血管生成。
姚慧静[3]（2019）在《血清内皮素-1和血管紧张素Ⅱ与肝硬化门静脉高压机制的相关性研究》文中指出研究背景和目的肝硬化门脉高压症是临床较多见的一类综合症,它的病因有很多种,但在我国大多数为肝炎后肝硬化,临床上可见多系统受累,代偿期症状较轻,晚期则以肝功能损害和门脉高压为主要表现,出现上消化道出血、肝性脑病、腹水、肝癌等严重并发症。肝静脉压力梯度（hepatic venous pressure gradient,HVPG）是指肝静脉楔压与自由压之差。正常HVPG是3-5mmHg,>5mmHg定义为门脉高压。对于肝硬化门脉高压症的发病机制,目前有多种学说,如阻力学说即后向性血流学说,门脉高压高动力学说又称为前向性血流学说,液递学说等等。近期国内有研究者认为,内脏高动力循环、内脏血管病变、门静脉高压症彼此间互相影响,其中各种肝脏疾病引起门脉入肝血流受阻是造成门脉高压的起始因素,是后续各种病理改变的原因,这即为“门静脉高压性血管病变”学说。而有关ET-1和Ang Ⅱ在心血管系统中的作用实验比较成熟及热门,由于其不仅有强烈的缩血管作用,还能结合其特定受体而引起细胞收缩,促进细胞增殖,上调原癌基因和早期基因的表达,提示ET-1、Ang Ⅱ可促进血管外基质的合成,从而在血管构型的改建中发挥作用。我们推测两者可能在肝硬化门脉高压中亦可能发挥作用,但其作用机制如何呢?本研究通过收集患者的一些数据,测量血清ET-1和Ang-Ⅱ水平,收集的肝硬化患者中病因分类、并发症种类、肝功能Child-pugh分级、食管黏膜下静脉MDCT评分,胃镜下表现等,应用Logistic回归分析,研究收集的肝硬化患者中肝炎后肝硬化、合并腹水、肝功能Child-pugh分级、食管黏膜下静脉MDCT评分、血清ET-1、血清Ang-Ⅱ等因素是否与肝硬化患者HVPG升高有关;最后通过大鼠试验,观察内皮素1（ET-1）、血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）及其他相关因子在肝硬化门脉高压阻断剂治疗前后的差异。第一部分:肝硬化患者肝静脉压力梯度（HVPG）与患者血清ET-1、Ang-Ⅱ的关系研究目的:分析肝硬化患者肝静脉压力梯度（HVPG）与患者血清ET-1、Ang-Ⅱ的关系。方法:收集2017年1月至2017年12月在我院消化内科住院治疗并行HVPG检测的120例肝硬化患者。根据HVPG值分为<1 OmmHg组（HVPG值为<10mmHg）,≥1OmmHg组（HVPG值>10mmHg）。比较两组患者的临床特征及血清ET-1、Ang-Ⅱ水平差异,对肝硬化患者HVPG的影响因素进行分析,分析HVPG与患者血清ET-1、Ang-Ⅱ的关系。结果:120例患者中,HVPG<10mmHg者纳入47例,≥1OmmHg者纳入73例。≥10mmHg组肝炎后肝硬化、合并腹水、肝功能为B和C级、食管黏膜下静脉MDCT评分为2-3分的比例均明显高于<10mmHg组,血清ET-1、Ang-Ⅱ水平明显高于<10mmHg组（P<0.05）。Logistic回归分析结果显示肝炎后肝硬化、合并腹水、肝功能Child-pugh分级、食管黏膜下静脉MDCT评分、血清ET-1、血清Ang-Ⅱ水平均是肝硬化患者HVPG升高的影响因素（P<0.05）。结论:肝炎后肝硬化、合并腹水、肝功能Child-pugh分级、食管黏膜下静脉MDCT评分、血清ET-1、血清Ang-Ⅱ水平均是肝硬化患者HVPG升高的影响因素（P<0.05）。第二部分:不同药物干预对肝硬化大鼠血清内皮素1及血管紧张素Ⅱ的影响目的:探讨不同药物干预对肝硬化大鼠肝脏组织学、血清内皮素1及血管紧张素Ⅱ表达的影响。方法:将60只健康Wister雄性大鼠,随机分为对照组（A组）、肝硬化门脉高压组（B组）、波生坦组（C组）、氯沙坦组（D组）、卡托普利组（E组）,每组12只。A组作为健康对照未进行建模。B、C、D、E组采用CC14、苯巴比妥复合建立肝硬化门脉高压症大鼠模型;在成模期,B组未给予药物干预,C、D、E组依次给予波生坦（100mg/kg）、氯沙坦（100mg/kg）、卡托普利（100mg/kg）灌胃干预。对各组大鼠肝组织进行HE、Massion染色及门静脉压力测定;检测各组大鼠门静脉血清ET-1、Ang-Ⅱ水平,对各组门静脉进行HE、Massion染色,采用免疫组化检测门静脉NF-κB、TGF-β的表达,以原位杂交实验检测VEGF mRNA的表达,并用实时定量PCR（RT-PCR）法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的相对表达情况。门脉测压的方法:大鼠开腹,显露门静脉主干后,以游标卡尺量测量主干外径,通过测压导管经大鼠肠系膜前静脉至门静脉主干,通过压力换能器及生理记录仪测量压力变化,脊柱前缘设置为0,间接测量门脉压力。结果:（1）肝硬化门静脉高压建模情况:①B、C、D、E组大多数动物在诱导过程中活动逐渐减少,精神不振,食欲欠佳,每天饮水20-25ml,反应迟钝,皮肤无光泽,有不同程度的腹水,体重减轻。存活大鼠数量:A组12只,B组8只,C组9只、D组8只、E组10只。HE染色发现,A组肝小叶结构完整,肝索排列整齐,肝细胞形态正常;模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）肝小叶结构紊乱形成假小叶,小叶间胆管增生,大量炎细胞侵润。Masson染色:A组汇管区无纤维组织增生,肝中央静脉周和肝血窦周偶见少量的网状纤维。模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）汇管区纤维组织广泛增生,大量炎细胞浸润,破坏了肝小叶正常结构,并将其分割成大小不一、圆形或类圆形的肝细胞团,形成假小叶和小结节性肝硬变,但肝细胞再生不明显。模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）门脉压力明显高于A组,C、D、E组门脉压力明显低于B组（P<0.05）。②肉眼可见,模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）)门静脉较A组明显增粗。HE、Massion染色:A组内膜较薄,中膜由几层排列疏松的环行平滑肌构成,外膜较厚,由结缔组织构成,常含有较多的纵行平滑肌束;模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）内膜呈弥漫性或局部增厚,含大量平滑肌细胞和胶原纤维;局部增生呈丘状向腔内突出,受损血管内皮表面有微小血栓形成;中膜平滑肌细胞增生、肥大,肌纤维增粗,致密,并有部分向内膜突出。（2）免疫组织化B、C、D、E组的NF-κB、TGF-β表达水平及强度均高于A组（P<0.05）;C、D、E组的NF-κB、TGF-β表达水平、强度和积分光密度均低于B组;E组NF-κB、TGF-β表达水平、强度和积分光密度均低于C、D组（P<0.05）。（3）原位杂交结果A组正常门静脉有较少的VEGF mRNA表达,而肝硬化门脉高压症大鼠模型（B、C、D、E）的门静脉VEGFmRNA表达水平显着上调（P<0.05）;B、C、D、E组VEGFmRNA阳性表达的阳性细胞数和积分光密度均明显高于A组,C、D、E组均较B组降低;E组明显低于C、D组（P<0.05）。（4）Rt-PCR结果:模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）门静脉的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达均明显高于A组,C、D、E组门静脉的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达均明显低于B组,E组门静脉的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达均低于C组和D组（P<0.05）。（5）各组血清ET-1、Ang-Ⅱ水平比较情况模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）门静脉血清ET-1、Ang-Ⅱ水平均明显高于A组,D、E组门静脉血清ET-1水平均明显低于B组、C组,C组、E组血清Ang-Ⅱ水平均明显低于B组和D组（P<0.05）。（6）各组门静脉压力比较情况模型组（B）、不同的药物干预组（C、D、E组）门静脉压力水平均明显高于A组,C、D、E组门静脉压力明显低于B组（P<0.05）。结论:本研究通过动物实验发现,肝硬化时血清ET-1、Ang-Ⅱ明显升高,且与血清及组织学肝纤维化程度相一致;而采用相应拮抗剂的药物干预,会缓解肝纤维化程度。从而提示,ET-1、Ang-Ⅱ参与肝硬化门脉高压症的发生和进展。
国家中医药管理局国家中医临床研究基地办公室[4]（2013）在《我国16个重点病种的国家中医临床研究基地论文统计表（2008年～2013年）》文中进行了进一步梳理
杨雪丰[5]（2013）在《JAK2/STAT3信号转导通路在门静脉高压大鼠模型脾脏纤维化过程中的作用》文中提出脾肿大是门脉高压症的重要并发症之一[1]。据统计，大约36%-92%的肝硬化患者存在着不同程度脾脏肿大[2]，特别是在我国，乙型病毒性肝炎导致的失代偿期肝硬化是引起脾肿大的主要原因之一[3]，严重危害着患者的生命健康。门脉高压性脾脏肿大可以产生一系列的并发症[4-5]：1、压迫腹腔周围脏器产生相应症状；2、脾功能亢进导致贫血；3、导致机体免疫功能下降；4、可能因轻微碰撞而发生破裂出血；5、机体储血能力下降等。纤维组织增生是门脉高压症脾脏肿大的重要原因之一，也是其主要病理特征之一。JAK2/STAT3信号转导通路是一条多种细胞因子参与的信号转导途径，最初因为参与细胞增殖而被发现，在后续的研究中发现该信号转导通路与机体的多种组织器官的细胞分化、凋亡、免疫功能改变等密切相关[6]。有研究表明该信号转导通路可能参与机体组织器官的纤维化过程[7-12]。在肾间质纤维化过程中JAK2/STAT3信号转导通路被激活提示该通路可能参与了组织纤维化。JAK2/STAT3信号转导通路还通过调节多种细胞因子促进血管平滑肌细胞和成纤维细胞增生、迁移。既往研究表明JAK2/STAT3信号转导通路在组织纤维化过程中发挥重要作用，但是否参与门脉高压症脾脏纤维化过程尚未得到研究证实。本实验通过Masson三色纤维染色技术、免疫组化技术及蛋白免疫印记技术检测门静脉高压大鼠模型中STAT3和P-STAT3蛋白水平及脾肿大纤维化程度，通过比较JAK2/STAT3信号转导通路表达与脾脏肿大纤维化程度的相关程度，进而探讨JAK2/STAT3信号转导通路在门脉高压症脾脏纤维化过程中的作用和意义。目的：探讨JAK2/STAT3信号转导通路在门静脉高压大鼠模型脾脏纤维化过程中的表达情况，深入分析JAK2/STAT3信号转导通路在门脉高压症脾脏组织纤维化过程中的作用，为临床上门静脉高压症脾脏肿大的治疗提供新的研究基础和治疗思路。方法：制作门静脉高压大鼠模型，并随机分为单纯手术组、AG490组，假手术组仅行开关腹手术。采用Masson三色纤维染色检测脾脏纤维化程度；免疫组织化学法检测脾脏P-STAT3蛋白表达水平；蛋白免疫印迹方法检测总STAT3蛋白和P-STAT3蛋白表达水平。结果：1、在单纯手术组大鼠脾脏中有大量纤维组织增生。AG490组大鼠脾脏纤维增生明显减少。假手术组仅有少量纤维组织。三组大鼠脾脏纤维化面积占比差异均有统计学意义（P<0.01）。2、P-STAT3蛋白染色阳性细胞主要位于被膜下以及红髓、边缘区。单纯手术组的P-STAT3蛋白表达水平显着高于AG490组，假手术组表达水平最低，3组脾脏P-STAT3蛋白表达量差异有统计学意义（P<0.05）。总STAT3蛋白水平在3组间差异没有统计学意义（P>0.05）3、Spearman相关性分析表明，P-STAT3蛋白表达率与大鼠脾脏纤维化程度呈正相关性（R=0.897, P<0.05）。结论：门静脉高压大鼠模型脾脏组织中P-STAT3蛋白表达上调，JAK2/STAT3信号转导通路被激活。P-STAT3蛋白表达与脾脏纤维化程度成正相关，提示JAK2/STAT3信号转导通路可能参与门静脉高压脾脏纤维化进展过程。
王鹏[6]（2011）在《ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达变化》文中指出背景:门静脉高压症（Portal hypertension,PHT）是常见的临床综合征,其病理特点是门静脉系统压力升高,导致门静脉血流不进入肝脏而通过形成的侧支循环,直接进入体循环,多方面机制可导致其发生[1]。正常门静脉压力值为1-5mmHg,门脉高压症时压力值大都升至10mmHg以上[2]。门静脉是由脾静脉、肠系膜上、下静脉汇合成,其中约20%的血液来自脾静脉。所以,门脉高压症时脾静脉的形态学与血流动力学的改变是近年来研究的一个热点。研究发现,门脉高压症时脾静脉壁出现动脉化构形改变,主要表现为内膜出现弥漫性或局灶性增厚斑,呈丘状突向腔内,内含大量平滑肌细胞或胶原纤维,无泡沫细胞;中膜明显增厚肌纤维增粗、致密;外膜层炎性细胞浸润,称为“动脉粥样硬化样增生性病变（Para-atherosclerosis,PAS）”[3]。但是其形成机制尚未完全研究清楚。Rho激酶又称Rho相关卷曲蛋白激酶（Rho associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK）,是小G蛋白RhoA的下游靶效应分子。相关研究表明RhoA/ROCK信号通路不仅调节平滑肌细胞肌动蛋白的聚合作用,而且还影响平滑肌的收缩、迁移和增殖等功能[4]。肌球蛋白轻链磷酸酶（myosin light chain phosphatase,MLCP）的肌球蛋白结合亚基（myosine phosphatae targeting subunit 1,MYPT-1）是活化的ROCK的底物[5]。研究已证实,在哮喘、动脉粥样硬化病灶和高血压血管病灶等组织中ROCK均过度表达[6-8]。目的:研究Rho激酶（ROCK-I）及其底物肌球蛋白磷酸酶肌球蛋白结合亚基（myosine phosphatae targeting subunit 1,MYPT-1）在门脉高压症病变的脾静脉壁中的表达情况,初步分析Rho/ROCK信号转导通路在门脉高压症时脾静脉病变中的作用。进一步为门脉高压症的临床诊断、治疗等各方面提供新的理论依据。方法:1、采用免疫组织化学方法,检测ROCK-I及MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达情况,定性分析ROCK-I及MYPT-1的表达与脾静脉壁的病变的关系。2、采用蛋白免疫印迹方法,检测ROCK-I及MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达量,半定量分析ROCK-I及MYPT-1的表达与脾静脉壁的病变的相关性。3、分析ROCK-I及MYPT-1两者的表达是否具有相关性。结果:1、免疫组化结果显示:ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症病变的脾静脉壁中表达明显上调（P<0.01）,较对照组差异有统计学意义。2、蛋白免疫印迹结果显示:ROCK-I和MYPT-1的蛋白表达水平在实验组中明显升高（P<0.01）,较对照组差异有统计学意义。3、ROCK-I和MYPT-1两种蛋白的表达,二者呈显着正相关（r=0.858, P<0.01）。结论:门脉高压症患者脾静脉壁中明显存在ROCK表达上调,而且MYPT-1的表达上调说明ROCK功能活化增强,提示Rho/ROCK信号转导通路在门脉高压症脾静脉的动脉化构形改建中发挥重要作用。
杜波涛[7]（2011）在《TF、VEGF在肝硬化门静脉高压症患者脾脏组织中的表达和意义》文中研究表明门静脉脉高压症（portal hypertension, PHT）时患者脾脏肿大和脾功能亢进是最常见临床症状和体征,近年来研究发现门静脉脉高压症单纯的脾淤血并不引起脾肿大,脾脏肿大的原因主要是血容量的增加和细胞成份增加。脾脏结构的改变对脾脏自身功能和在促进门静脉脉高压症的病程发展方面起着重要作用。组织因子（tissue factor, TF）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）在机体血管再生、组织构建、损伤修复等方面起着重要作用,对门静脉高压患者脾脏组织血管病变和细胞成分增加起着不可替代的作用。目的研究组织因子（tissue factor, TF）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）在肝硬化门静脉高压症患者脾脏组织中的表达和分布。分析TF和VEGF在脾脏肿大、脾功能亢进、脾脏内脏高动力学形成机制中的作用和意义,并探讨TF和VEGF在脾脏上表达与门静脉脉高压症临床特征之间的关系。方法采用免疫组化SP法分别检测实验组（42例乙肝肝硬化门静脉脉高压症患者的脾脏组织）和对照组（15例因外伤脾脏切除患者的脾脏组织）的TF和VEGF分布和表达情况,分析其与临床特征之间的关系及两者在门静脉高压症患者脾脏组织表达的相关性。结果1.TF在实验组和对照组的中的表达差异性有统计学意义（P<0.01）,TF的表达与肝功Child -Pugh分级、术前是否上消化道出血及术前食管胃底静脉曲张程度均无关（P>0.05）,TF的表达与不同分级（轻、中、重）脾脏肿大和脾功能亢进的脾脏组织中的表达经统计学检验均有统计学意义（P<0.05）。2. VEGF在实验组和对照组的中的表达有差异性有统计学意义（P<0.01）,VEGF的表达与肝功Child -Pugh分级、术前是否上消化道出血及术前食管胃底静脉曲张程度均无关（P>0.05）,VEGF的表达与不同分级（轻、中、重）脾脏肿大和脾功能亢进的脾脏组织中的表达经统计学检验均有统计学意义（P<0.05）。TF和VEGF在实验组的脾脏表达呈正相关关系（r=0.490,P=0.001）。结论1.实验组中TF和VEGF表达明显增强,提示TF和VEGF表达可能参与门静脉高压状态下脾脏内结构的构建,促进了门静脉高压症脾大、脾功能亢进和脾脏内脏高动力循环的形成。2.TF和VEGF在门静脉高压症患者脾脏组织中表达部位基本一致且两者表达具有正相关关系,提示两者在脾脏结构和功能改变方面具有协同作用。
盛华均[8]（2007）在《受压静脉管壁重塑机制的研究》文中提出第一部分人体左髂总静脉的形态学研究目的:研究左髂总静脉（LCIV）受压部位及相邻节段的形态结构特征,以探讨LCIV受压后的力学特性及血管重塑机制。方法:解剖80例无明显异常的成年尸体（男42例,女38例）,观测LCIV受压段及相邻节段外径、右髂总动脉（RCIA）与LCIV的相交角度以及右髂总静脉（RCIV）相应部位的外径;随机选择18例标本采用Masson染色,观测受压段及其近侧、远侧段以及对侧相应部位的平滑肌（SM）、弹力纤维（EF）、胶原纤维（CF）等组织成分的变化。结果:受压段静脉管壁塌陷、菲薄。与对侧相应部位及受压处近侧和远侧段相比,受压处管径扩大（P<0.01）;与RCIV比较,LCIV各节段SM相对含量降低,而CF和EF相对含量增加（P<0.05 ）;与相邻节段相比,除近侧段的EF以外,其他各项指标差异都具有显着的统计学意义（P<0.05）。结论:（1）LCIV的受压,引起血流动力学改变,诱导产生管壁重塑,引起管壁弹性成分改建以及粘连结构形成。（2）上述形态改变进一步引起血流动力学紊乱,从而加剧组织学的改变。（3）这一系列变化可能是导致髂静脉压迫综合征和髂-股静脉血栓形成发生的重要原因。第二部分静脉受压动物模型的建立目的:建立稳定、可靠的静脉受压的动物模型,为进一步研究髂静脉压迫综合征及其它原因所致的静脉压迫性损伤的病理机制提供实验基础。方法: SD大鼠48只随机分为四组,用4.5#、5#、6#等型号注射针头放置于左髂总静脉旁,用相同的拉力将左髂总静脉和左髂总动脉与针头一同结扎,抽出针头,造成髂静脉不同程度的受压、狭窄。观测左髂总静脉腔内压力的变化和不同时间点的组织学表现（HE/Masson染色）以及左下肢的术后表现。结果: 4.5#、5#针头组出现明显的髂静脉压力增高（P< 0.05）,4.5#针头组左下肢术后出现淤血、涨肿,术后3天逐渐恢复。组织学改变随时间推移而愈发明显。假手术组、6#针头髂静脉压力则没有明显的变化。结论: （1）用5#针头作部分髂静脉结扎致髂静脉受压缩窄,是模拟人左髂总静脉受压的最佳选择;（2）静脉受压后血流动力学的改变可导致管壁形态和组织结构改变。第三部分c-myc、MMP9在受压静脉管壁的表达目的:检测c-myc蛋白和MMP-9在受压静脉管壁的表达,初步探讨静脉受压后血管重塑的分子机制。方法:42只SD大鼠随机分为对照组（21只）和实验组（每时间点各3只,共21只）,按第二部分方法造模。分别在0.5h、12h、24h、48h、72h、7d、14d取材,明胶液包埋后冰冻切片,用免疫组化SP法检测c-myc蛋白和MMP-9的表达,采用计算机图像分析系统测定切片的平均积分光密度（IOD）。结果:对照组和正常静脉管壁均未见c-myc蛋白、MMP-9表达,实验组c-myc蛋白从12h开始表达,MMP-9从24h开始表达上调,并逐渐增强, IOD逐渐升高,与对照组比较,差异具有显着性（P <0.05）。7d时两者表达同时达到高峰。c-myc蛋白与MMP-9在受压静脉管壁的表达呈正相关（r=0.7532, P <0.05）结论:c-myc基因产物和MMP-9在受压静脉管壁表达增强,两者在受压静脉管壁重塑过程起着重要作用;c-myc基因和MMP-9的表达具有相关性。
林德新[9]（2004）在《门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的研究》文中提出目的 检测门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的相关调控基因的表达状况,探讨其对脾动脉构型改建的调节以及对门脉高压症内脏高动力循环的影响。方法 应用光学显微镜、透射电镜和免疫组织化学法分别对21例门静脉高压症患者脾动脉（实验组）和7例正常血管（对照组）的平滑肌细胞进行细胞形态学观察和Ki-67、Bax及Bcl-2蛋白的检测。结果 门静脉高压症患者脾动脉管径增大,管壁变硬,内皮细胞受损,内膜明显增厚,内膜下间隙有大量平滑肌细胞和纤维结缔组织。中膜平滑肌细胞增厚,并迁至内膜增殖。内弹性膜和中膜弹性纤维被拉直、断裂和分层。电镜下可见平滑肌细胞变性、萎缩和凋亡,部分平滑肌细胞的表型由收缩型向合成型转变。Ki-67、Bax和Bcl-2在门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞中阳性表达的细胞数占总细胞数分别为（35.82±11.17）%,（32.23±11.05）%和（8.80±4.51）%。分别与正常对照组（2.41±2.42）%,（1.53±2.32）%和（2.22±1.95）%比较,差异有显着性（P﹤0.01）。结论 门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞可发生增殖与凋亡,增殖与凋亡共同参与并调节了脾动脉构型改建,使其收缩结构破坏和对缩血管活性物质反应性下降,可能是造成内脏高动力循环的原因之一。
曾金华[10]（2003）在《门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究》文中认为目的:研究门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc mRNA表达的关系。方法:应用RT-PCR和免疫组化法对28例门脉高压症患者的脾静脉、12例正常血管分别进行c-myc mRNA和增殖细胞核抗原（PCNA）的检测。结果:门脉高压症患者脾静脉PCNA蛋白表达阳性指数为（29.8±4.2）％;c-myc mRNA在PCNA蛋白表达阳性组和阴性组分别为（7.61±1.04％）和（3.82±0.92）％,正常对照组血管中PCNA蛋白无表达、c-myc mRNA表达为（1.04±0.21）％,两者同时与对照组比较,统计学上有显着性差异（P<0.01）。结论:c-myc基因是门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增殖的起动基因,门脉血流动力学紊乱激活脾静脉壁平滑肌细胞中原癌基因,促使血管平滑肌细胞增殖、迁移和表型改变,导致脾静脉血管重塑,使血管对缩血管物质反应降低。
二、门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究（论文提纲范文）
（1）益气活血方有效成分抑制巨噬细胞氧化亢进，防治门脉高压症的药理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验一 巨噬细胞参与大鼠门脉高压 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结果 |
| 5 参考文献 |
| 实验二 益气活血方有效成分防治门脉高压的药效 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 参考文献 |
| 实验三 益气活血方有效成分抑制巨噬细胞氧化亢进防治门脉高压药理 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 参考文献 |
| 全文结论 |
| 文献综述一 脂质体研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 门脉高压发病机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述三 益气活血方有效成分防治门脉高压药理作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）GATA6/LOXL2复合体以及MACC1促进胆管癌血管生成的机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| abstract |
| 中文摘要 |
| 第一部分 GATA6/LOXL2 复合体促进胆管癌血管生成的机制研究 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 数据库中分析GATA6和LOXL2 在胆管癌中的表达以及与VEGFA的相关性 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 GATA6/LOXL2 的表达与胆管癌患者临床病理特征的相关性 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 GATA6/LOXL2 复合体转录调控VEGFA的表达 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 GATA6/LOXL2 复合体上调VEGFA分泌促进胆管癌血管生成 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 本部分总结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 MACC1 促进胆管癌血管生成的机制研究 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 分析MACC1和VEGFA在胆管癌中表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 分析MACC1和VEGFA的表达与病人预后的关系 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 MACC1 上调VEGFA的表达并促进血管生成 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 本部分总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 赖氨酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)与疾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（3）血清内皮素-1和血管紧张素Ⅱ与肝硬化门静脉高压机制的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 肝硬化患者肝静脉压力梯度(HVPG)与患者血清ET-1、Ang-Ⅱ的关系研究 |
| 对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 不同药物干预对肝硬化大鼠血清内皮素1及血管紧张素Ⅱ的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 今后的展望 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 英文论文1 |
| 英文论文2 |
（5）JAK2/STAT3信号转导通路在门静脉高压大鼠模型脾脏纤维化过程中的作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验样本 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 组织石蜡切片制作 |
| 2.2 Masson 三色染色 |
| 2.3 免疫组织化学法染色 |
| 2.4 Western-blot 蛋白免疫印记 |
| 3 结果 |
| 3.1 Masson 三色染色结果 |
| 3.2 免疫组织化学染色结果 |
| 3.3 免疫印记技术检测结果 |
| 3.4 P-STAT3 蛋白阳性细胞表达率与脾脏纤维化面积的相关性比较结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（6）ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达变化（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 一、Rho/ROCK 信号转导通路概述 |
| 二、门静脉高压症概述 |
| 三、研究意义 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验样本 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 组织石蜡切片制作 |
| 2.2 HE 染色法 |
| 2.3 免疫组织化学法染色 |
| 2.4 Western-blot 蛋白免疫印记 |
| 2.5 结果判读方法 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 脾静脉壁形态学改变 |
| 3.2 ROCK-Ⅰ和MYPT-1 蛋白免疫组化染色的表达 |
| 3.3 Western Blot 检测ROCK-Ⅰ和MYPT-1 蛋白的表达水平 |
| 3.4 MYPT-1 蛋白的表达水平及其与ROCK-Ⅰ蛋白表达的相关性 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（7）TF、VEGF在肝硬化门静脉高压症患者脾脏组织中的表达和意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述1 组织因子的结构及功能研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 血管内皮生长因子与门静脉高压症研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（8）受压静脉管壁重塑机制的研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 人体左髂总静脉的形态学研究 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 照片（一） |
| 参考文献 |
| 第二部分 静脉受压动物模型的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 照片（二） |
| 参考文献 |
| 第三部分 c-myc、MMP9 在受压静脉管壁的表达 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 照片（三） |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 问题与展望 |
| 文献综述 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间撰写、发表的学术论文 |
（9）门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前 言 |
| 主要试剂和仪器 |
| 材料与方法 |
| 结 果 |
| 讨 论 |
| 结 论 |
| 参考文献 |
| 致 谢 |
| 综 述 |
四、门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究（论文参考文献）
- [1]益气活血方有效成分抑制巨噬细胞氧化亢进，防治门脉高压症的药理研究[D]. 李爽. 北京协和医学院, 2020(05)
- [2]GATA6/LOXL2复合体以及MACC1促进胆管癌血管生成的机制研究[D]. 彭滔. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [3]血清内皮素-1和血管紧张素Ⅱ与肝硬化门静脉高压机制的相关性研究[D]. 姚慧静. 山东大学, 2019(09)
- [4]我国16个重点病种的国家中医临床研究基地论文统计表（2008年～2013年）[J]. 国家中医药管理局国家中医临床研究基地办公室. 世界科学技术-中医药现代化, 2013(05)
- [5]JAK2/STAT3信号转导通路在门静脉高压大鼠模型脾脏纤维化过程中的作用[D]. 杨雪丰. 第四军医大学, 2013(03)
- [6]ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达变化[D]. 王鹏. 第四军医大学, 2011(04)
- [7]TF、VEGF在肝硬化门静脉高压症患者脾脏组织中的表达和意义[D]. 杜波涛. 郑州大学, 2011(04)
- [8]受压静脉管壁重塑机制的研究[D]. 盛华均. 重庆医科大学, 2007(02)
- [9]门静脉高压症患者脾动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的研究[D]. 林德新. 福建医科大学, 2004(01)
- [10]门脉高压症患者肝外血管平滑肌细胞增生与c-myc基因表达的相关性研究[J]. 曾金华. 中西医结合肝病杂志, 2003(S1)